Ga naar de inhoud
Lama-84 Cellen
Weefsel
Bloed
Ziekte
Chronische myeloïde leukemie
Synoniemen
LAMA-84, LAMA84, Lama84

Documenten

Lama-84 Cellen

Cell line · Productnummer 300261

LAMA-84 is een menselijke cellijn die is afgeleid van het perifere bloed van een patiënt met chronische myeloïde leukemie (CML) in de blastcrisis. Deze cellijn wordt gekenmerkt door...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

LAMA-84 is een menselijke cellijn afkomstig uit het perifere bloed van een patiënt met chronische myeloïde leukemie (CML) in blastcrisis. Deze cellijn wordt gekenmerkt door de aanwezigheid van het Philadelphia-chromosoom, dat resulteert in het BCR-ABL fusiegen, een kenmerk van CML. Het BCR-ABL oncogen staat bekend om zijn rol in het verhogen van de tyrosinekinase activiteit, wat verschillende signaalroutes bevordert die leiden tot ongecontroleerde celproliferatie en resistentie tegen apoptose. LAMA-84 cellen zijn daarom een model van onschatbare waarde voor het bestuderen van de moleculaire mechanismen van CML-progressie en voor het evalueren van de werkzaamheid van tyrosinekinaseremmers (TKI's) in een preklinische setting.

In het onderzoek is LAMA-84 uitgebreid gebruikt om de biologie van CML te begrijpen, met name in de context van resistentie tegen geneesmiddelen en evolutie van de ziekte. Studies met deze cellijn hebben geholpen bij het ophelderen van de cellulaire reacties op verschillende generaties TKI's, zoals imatinib, dasatinib en nilotinib. Bovendien heeft LAMA-84 bijgedragen aan het onderzoek naar nieuwe therapeutische strategieën gericht op het overwinnen van TKI-resistentie, waaronder het testen van combinatietherapieën die zich richten op andere signaalroutes die synergetisch worden beïnvloed door het fusie-eiwit BCR-ABL.

Weefsel
Bloed
Ziekte
Chronische myeloïde leukemie
Synoniemen
  • LAMA-84
  • LAMA84
  • Lama84

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Ronde cellen
Verdubbelingstijd
30 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Lama-84 (Cytion catalogusnummer 300261)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0388

05Expressie en vatbaarheid

Oppervlakte-antigenen
GPIIb/IIIa+, GPIIIa+
Mutatieprofiel
BCR-ABL1 pos
Virussen
EBNA, EA en VCA werden niet gedetecteerd

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% hitte-geïnactiveerde FBS
Heruitplanten
Cellen die aan de bodem van de celkweekfles kleven, kunnen door schudden worden losgemaakt. Onderhoud de kweken door regelmatig medium toe te voegen of te vervangen. Start de kweken met een dichtheid van 5 x 105 cellen/ml en houd de celconcentratie binnen het bereik van 3 x 105 tot 1 x 106 cellen/ml voor een optimale groei.
Zaaidichtheid
1 tot 2 x 104 cellen/cm2
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
29 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch