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Células Lama-84
Tecido
Sangue
Doença
Leucemia mieloide crónica
Sinónimos
LAMA-84, LAMA84, Lama84

Documentos

Células Lama-84

Cell line · Número do produto 300261

A LAMA-84 é uma linha celular humana derivada do sangue periférico de um doente com leucemia mielóide crónica (LMC) em crise blástica. Esta linha celular é caracterizada...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

A LAMA-84 é uma linha celular humana derivada do sangue periférico de um doente com leucemia mieloide crónica (LMC) em crise blástica. Esta linha celular é caracterizada pela presença do cromossoma Filadélfia, que resulta no gene de fusão BCR-ABL, uma caraterística distintiva da LMC. O oncogene BCR-ABL é conhecido pelo seu papel no aumento da atividade da tirosina quinase, que promove várias vias de sinalização que conduzem a uma proliferação celular descontrolada e à resistência à apoptose. As células LAMA-84 são, portanto, um modelo inestimável para estudar os mecanismos moleculares da progressão da LMC e para avaliar a eficácia dos inibidores da tirosina quinase (TKIs) num contexto pré-clínico.

Na investigação, a LAMA-84 tem sido amplamente utilizada para compreender a biologia da LMC, especialmente no contexto da resistência aos medicamentos e da evolução da doença. Os estudos com esta linha celular ajudaram a elucidar as respostas celulares a diferentes gerações de TKI, como o imatinib, o dasatinib e o nilotinib. Além disso, a LAMA-84 contribuiu para a investigação de novas estratégias terapêuticas destinadas a ultrapassar a resistência aos TKI, incluindo o teste de terapias combinadas que visam outras vias de sinalização sinergicamente afectadas pela proteína de fusão BCR-ABL.

Tecido
Sangue
Doença
Leucemia mieloide crónica
Sinónimos
  • LAMA-84
  • LAMA84
  • Lama84

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Células redondas
Tempo de duplicação
30 horas

04Identificadores

Referência
Lama-84 (número de catálogo Cytion 300261)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0388

05Expressão e suscetibilidade

Antigénios de superfície
GPIIb/IIIa+, GPIIIa+
Perfil mutacional
BCR-ABL1 pos
Vírus
O EBNA, o EA e o VCA não foram detectados

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS inactivado pelo calor
Subcultura
As células aderidas ao fundo do frasco de cultura celular podem ser desalojadas por agitação. Mantenha as culturas adicionando ou substituindo periodicamente o meio. Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 105 células/ml e mantenha a concentração celular dentro da faixa de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para um crescimento ideal.
Densidade de sementeira
1 a 2 x 104 células/cm2
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
29 anos
Etnia
Caucasiano