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Celle Lama-84
Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia mieloide cronica
Sinonimi
LAMA-84, LAMA84, Lama84

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Celle Lama-84

Cell line · Codice prodotto 300261

LAMA-84 è una linea cellulare umana derivata dal sangue periferico di un paziente affetto da leucemia mieloide cronica (LMC) in crisi blastica. Questa linea cellulare è caratterizzata...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

LAMA-84 è una linea cellulare umana derivata dal sangue periferico di un paziente affetto da leucemia mieloide cronica (CML) in crisi di blasti. Questa linea cellulare è caratterizzata dalla presenza del cromosoma Philadelphia, che determina la fusione del gene BCR-ABL, un segno distintivo della CML. L'oncogene BCR-ABL è noto per il suo ruolo nell'aumentare l'attività della tirosin-chinasi, che promuove diverse vie di segnalazione che portano alla proliferazione cellulare incontrollata e alla resistenza all'apoptosi. Le cellule LAMA-84 sono quindi un modello prezioso per studiare i meccanismi molecolari della progressione della CML e per valutare l'efficacia degli inibitori della tirosin-chinasi (TKI) in un contesto preclinico.

Nella ricerca, LAMA-84 è stata ampiamente utilizzata per comprendere la biologia della CML, soprattutto nel contesto della resistenza ai farmaci e dell'evoluzione della malattia. Gli studi condotti su questa linea cellulare hanno contribuito a chiarire le risposte cellulari a diverse generazioni di TKI, come imatinib, dasatinib e nilotinib. Inoltre, LAMA-84 ha contribuito allo studio di nuove strategie terapeutiche volte a superare la resistenza ai TKI, compresa la sperimentazione di terapie di combinazione che mirano ad altre vie di segnalazione sinergicamente influenzate dalla proteina di fusione BCR-ABL.

Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia mieloide cronica
Sinonimi
  • LAMA-84
  • LAMA84
  • Lama84

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde
Tempo di raddoppio
30 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Lama-84 (numero di catalogo Cytion 300261)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0388

05Espressione e suscettibilità

Antigeni di superficie
GPIIb/IIIa+, GPIIIa+
Profilo mutazionale
BCR-ABL1 pos
Virus
EBNA, EA e VCA non sono stati rilevati

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Le cellule che aderiscono al fondo della fiasca di coltura cellulare possono essere staccate agitando. Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare nell'intervallo compreso tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
Densità di semina
Da 1 a 2 x 104 cellule/cm2
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
29 anni
Etnia
Caucasico