Mine otse sisu juurde
Lama-84 rakud
Kude
Veri
Haigus
Krooniline müeloidne leukeemia
Sünonüümid
LAMA-84, LAMA84, Lama84

Dokumendid

Lama-84 rakud

Cell line · Toote number 300261

LAMA-84 on inimrakuliin, mis on saadud blastkriisis oleva kroonilise müeloidse leukeemia (CML) patsiendi perifeersest verest. Seda rakuliini iseloomustab...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LAMA-84 on inimese rakuliin, mis on saadud perifeersest verest kroonilise müeloidse leukeemiaga (CML) patsiendi blastkriisist. Seda rakuliini iseloomustab Philadelphia kromosoomi olemasolu, mille tulemuseks on BCR-ABL fusioonigeen, mis on CML-i tunnusjoon. BCR-ABL onkogeen on tuntud oma rolli tõttu türosiinkinaasi aktiivsuse suurendamisel, mis soodustab erinevaid signaaliradu, mis viivad rakkude kontrollimatu proliferatsiooni ja apoptoosiresistentsuse tekkimiseni. LAMA-84 rakud on seega hindamatu väärtusega mudel CML-i progresseerumise molekulaarmehhanismide uurimiseks ja türosiinkinaasi inhibiitorite (TKI) tõhususe hindamiseks prekliinilises keskkonnas.

LAMA-84 rakke on teadusuuringutes laialdaselt kasutatud CML-i bioloogia mõistmiseks, eriti ravimresistentsuse ja haiguse evolutsiooni kontekstis. Selle rakuliiniga tehtud uuringud on aidanud selgitada rakkude reaktsiooni erinevatele TKIde põlvkondadele, nagu imatiniib, dasatiniib ja nilotiniib. Lisaks on LAMA-84 aidanud kaasa uute ravistrateegiate uurimisele, mille eesmärk on TKI-resistentsuse ületamine, sealhulgas selliste kombinatsiooniteraapiate katsetamisele, mis on suunatud teistele signaaliradadele, mida BCR-ABL-fusionivalk sünergiliselt mõjutab.

Kude
Veri
Haigus
Krooniline müeloidne leukeemia
Sünonüümid
  • LAMA-84
  • LAMA84
  • Lama84

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Kahekordistumisaeg
30 tundi

04Tunnused

Viide
Lama-84 (Cytioni katalooginumber 300261)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0388

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Pinnaantigeenid
GPIIb/IIIa+, GPIIIa+
Mutatsiooniprofiil
BCR-ABL1 pos
Viirused
EBNA-d, EA-d ja VCA-d ei tuvastatud

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Kultuuriklaasi põhja kinnitunud rakud võib raputamisega lahti saada. Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuure tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
1 kuni 2 x 104 rakku/cm2
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
29 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia