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Células Lama-84
Pañuelo de papel
Sangre
Enfermedad
Leucemia mieloide crónica
Sinónimos
LAMA-84, LAMA84, Lama84

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Células Lama-84

Cell line · Número de producto 300261

LAMA-84 es una línea celular humana derivada de la sangre periférica de un paciente con leucemia mieloide crónica (LMC) en crisis blástica. Esta línea celular se caracteriza...

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01Información general

Descripción

LAMA-84 es una línea celular humana derivada de la sangre periférica de un paciente con leucemia mieloide crónica (LMC) en crisis blástica. Esta línea celular se caracteriza por la presencia del cromosoma Filadelfia, que da lugar al gen de fusión BCR-ABL, un rasgo distintivo de la LMC. El oncogén BCR-ABL es conocido por su papel en el aumento de la actividad tirosina cinasa, que promueve diversas vías de señalización que conducen a la proliferación celular incontrolada y a la resistencia a la apoptosis. Así pues, las células LAMA-84 son un modelo inestimable para estudiar los mecanismos moleculares de la progresión de la LMC y para evaluar la eficacia de los inhibidores de la tirosina cinasa (ITC) en un entorno preclínico.

En investigación, LAMA-84 se ha utilizado ampliamente para comprender la biología de la LMC, especialmente en el contexto de la resistencia a los fármacos y la evolución de la enfermedad. Los estudios realizados con esta línea celular han ayudado a dilucidar las respuestas celulares a diferentes generaciones de TKI, como imatinib, dasatinib y nilotinib. Además, LAMA-84 ha contribuido a la investigación de nuevas estrategias terapéuticas dirigidas a superar la resistencia a los TKI, incluido el ensayo de terapias combinadas dirigidas a otras vías de señalización afectadas sinérgicamente por la proteína de fusión BCR-ABL.

Pañuelo de papel
Sangre
Enfermedad
Leucemia mieloide crónica
Sinónimos
  • LAMA-84
  • LAMA84
  • Lama84

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Células redondas
Tiempo de duplicación
30 horas

04Identificadores

Referencia
Lama-84 (número de catálogo 300261 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0388

05Expresión y susceptibilidad

Antígenos de superficie
GPIIb/IIIa+, GPIIIa+
Perfil mutacional
BCR-ABL1 pos
Virus
No se detectaron EBNA, EA ni VCA

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS inactivado por calor
Subcultivo
Las células adheridas al fondo del frasco de cultivo celular pueden desprenderse agitando. Mantenga los cultivos añadiendo o sustituyendo el medio periódicamente. Inicie los cultivos con una densidad de 5 x 105 células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para un crecimiento óptimo.
Densidad de siembra
1 a 2 x 104 células/cm2
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
29 años
Origen étnico
Caucásico