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A-253
Tissu
Glandes sous-mandibulaires
Maladie
Carcinome épidermoïde
Synonymes
A 253, A253

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A-253

Cell line · Référence du produit 305524

The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...

€550.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire A-253 est une lignée de cellules épithéliales humaines dérivée d’un carcinome épidermoïde de la glande salivaire sous-maxillaire. Ce modèle cellulaire est largement utilisé pour étudier la physiopathologie des glandes salivaires, en particulier dans le contexte de maladies auto-immunes telles que le syndrome de Sjögren (SS). Le SS est une maladie auto-immune chronique affectant les glandes exocrines, qui entraîne des symptômes de sécheresse buccale (xérostomie) et oculaire (kératoconjonctivite sèche), ainsi que des lésions du tissu glandulaire. Dans les cellules A-253, des études ont montré que certains auto-anticorps présents chez les patients atteints du SS, tels que les anticorps anti-Ro et anti-La, peuvent déclencher l’apoptose par des voies à la fois intrinsèques et extrinsèques. Ce processus se produit par le biais d’interactions avec les récepteurs Fc gamma (Fcγ) à la surface cellulaire, ce qui conduit à l’internalisation de ces auto-anticorps et à l’activation de cascades de signalisation apoptotiques impliquant des caspases, notamment la caspase-3, la caspase-8 et la caspase-9.

Des recherches ont également porté sur les effets des polysaccharides végétaux sur la lignée cellulaire A-253, en particulier ceux issus de Dendrobium officinale, qui ont montré des effets protecteurs potentiels contre l’apoptose induite par le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α). Lorsqu’elles sont prétraitées avec ces polysaccharides, les cellules A-253 présentent une réduction des marqueurs apoptotiques induits par le TNF-α, telle qu’une diminution de la production d’espèces réactives de l’oxygène (ERO), la préservation du potentiel membranaire mitochondrial et une réduction de la translocation du facteur nucléaire kappa B (NF-κB) vers le noyau. Ces observations suggèrent un rôle potentiel de ces polysaccharides dans l’atténuation des lésions d’origine immunitaire au niveau des glandes salivaires et dans l’ouverture d’une nouvelle voie thérapeutique pour les maladies auto-immunes telles que le syndrome de Sjögren (SS), où une apoptose excessive contribue au dysfonctionnement glandulaire et à l’inflammation.

Dans l’ensemble, les cellules A-253 constituent un modèle important pour comprendre l’apoptose des cellules des glandes salivaires et les mécanismes moléculaires sous-jacents aux lésions auto-immunes des glandes salivaires. Cela inclut l’étude de l’activation des caspases, de la déstabilisation mitochondriale et des effets des cytokines pro-inflammatoires, qui sont pertinents tant dans le syndrome de Sjögren que dans des recherches plus larges sur la résilience des cellules épithéliales et les interactions immunitaires.

Tissu
Glandes sous-mandibulaires
Maladie
Carcinome épidermoïde
Synonymes
  • A 253
  • A253

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale
Tumorigène
Oui, chez les souris nues et chez les souris nouveau-nées traitées avec du sérum anti-thymocytes

04Identifiants

Référence
A-253 (référence Cytion 305524)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1060

05Manipulation et culture

Milieu de culture
McCoys 5a, w : 3.0 g/L Glucose, w : Glutamine stable, w : 2.0 mM Pyruvate de sodium, w : 2.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820200a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2-4 × 10⁴/cm²
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
54 ans
Origine ethnique
Européen