Skip to content
A-253
Tissue
ต่อมน้ำลายใต้ขากรรไกร
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
A 253, A253

Documents

A-253

Cell line · Product number 305524

The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ A-253 เป็นสายเซลล์เยื่อบุผิวของมนุษย์ที่สกัดจากมะเร็งชนิดเอพิเดอร์มอยด์ของต่อมน้ำลายใต้ขากรรไกรล่าง แบบจำลองเซลล์นี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาพยาธิสรีรวิทยาของต่อมน้ำลาย โดยเฉพาะในบริบทของโรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเอง เช่น กลุ่มอาการชอยเกรน (SS) SS เป็นโรคภูมิคุ้มกันตัวเองเรื้อรังที่ส่งผลต่อต่อมน้ำลายภายนอก ซึ่งก่อให้เกิดอาการปากแห้ง (xerostomia) และตาแห้ง (keratoconjunctivitis sicca) รวมถึงความเสียหายของเนื้อเยื่อต่อม ในเซลล์ A-253 การศึกษาได้แสดงให้เห็นว่าแอนติบอดีออโตอิมมูนบางชนิดที่พบในผู้ป่วย SS เช่น แอนติ-Ro และ แอนติ-La สามารถกระตุ้นการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส (apoptosis) ได้ทั้งผ่านทางภายในและทางภายนอก กระบวนการนี้เกิดขึ้นผ่านการมีปฏิสัมพันธ์กับตัวรับ Fc gamma (Fcγ) บนพื้นผิวเซลล์ ซึ่งนำไปสู่การนำแอนติบอดีอัตโนมัติเหล่านี้เข้าสู่ภายในเซลล์ และการกระตุ้นชุดสัญญาณการตายแบบอะพอพโทซิสที่เกี่ยวข้องกับแคสเพส โดยเฉพาะอย่างยิ่งแคสเพส-3 แคสเพส-8 และแคสเพส-9

การวิจัยยังได้ศึกษาผลกระทบของโพลีแซคคาไรด์จากสมุนไพรต่อสายเซลล์ A-253 โดยเฉพาะจาก Dendrobium officinale ซึ่งแสดงให้เห็นถึงฤทธิ์ป้องกันที่มีศักยภาพต่อกระบวนการอะพอพโทซิสที่ถูกกระตุ้นโดยปัจจัยเนโครซิสของเนื้องอก-อัลฟา (TNF-α) เมื่อได้รับการรักษาล่วงหน้าด้วยโพลีแซคคาไรด์เหล่านี้ เซลล์ A-253 แสดงการลดลงของตัวบ่งชี้การตายแบบอะพอพโทซิสที่เกิดจาก TNF-α เช่น การลดลงของการผลิตอนุมูลออกซิเจน (ROS) การรักษาศักย์ไฟฟ้าของเยื่อหุ้มไมโทคอนเดรีย และการลดลงของการเคลื่อนย้ายของปัจจัยนิวเคลียร์-คัปปา บี (NF-κB) เข้าสู่แกนกลางเซลล์ ผลการสังเกตเหล่านี้ชี้ให้เห็นถึงบทบาทที่เป็นไปได้ของโพลีแซคคาไรด์ดังกล่าวในการลดความเสียหายที่เกี่ยวข้องกับระบบภูมิคุ้มกันในต่อมน้ำลาย และในการเปิดมุมมองการรักษาแบบใหม่สำหรับโรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเอง เช่น โรคต่อมน้ำลายแห้ง (SS) ซึ่งการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสที่มากเกินไปมีส่วนทำให้เกิดการทำงานผิดปกติของต่อมน้ำลายและการอักเสบ

โดยรวมแล้ว เซลล์ A-253 เป็นแบบจำลองสำคัญสำหรับการเข้าใจกระบวนการอะพอพโทซิสของเซลล์ต่อมน้ำลาย และกลไกโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังความเสียหายของต่อมน้ำลายจากโรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเอง ซึ่งรวมถึงการศึกษาการกระตุ้นการทำงานของแคสเปส (caspase) การไม่เสถียรของไมโทคอนเดรีย และผลกระทบของไซโตไคน์ที่ส่งเสริมการอักเสบ ซึ่งมีความเกี่ยวข้องทั้งในโรคซอเกรน (Sjögren’s syndrome) และในการวิจัยที่กว้างขึ้นเกี่ยวกับความทนทานของเซลล์เยื่อบุผิวและการปฏิสัมพันธ์ทางภูมิคุ้มกัน

Tissue
ต่อมน้ำลายใต้ขากรรไกร
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
  • A 253
  • A253

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีสี และหนูทารกที่ได้รับการรักษาด้วยเซรั่มต่อต้านเซลล์ไทโมไซต์

04Identifiers

Citation
A-253 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305524)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1060

05Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: เสถียร กลูตามีน, w: 2.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2–4 × 10⁴/cm²
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
54 ปี
Ethnicity
ยุโรป