İçeriğe atla
A-253
Doku
Submandibular bezler
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
A 253, A253

A-253

Cell line · Ürün numarası 305524

The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

A-253 hücre hattı, submaksiller tükürük bezindeki bir epidermoid karsinomdan elde edilen bir insan epitel hücre hattıdır. Bu hücre modeli, özellikle Sjögren sendromu (SS) gibi otoimmün hastalıklar bağlamında tükürük bezi patofizyolojisini incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. SS, ekzokrin bezleri etkileyen kronik bir otoimmün hastalıktır ve ağız kuruluğu (kserostomi) ile göz kuruluğu (keratokonjonktivit sikka) semptomlarının yanı sıra bez dokusunda hasara yol açar. A-253 hücrelerinde yapılan çalışmalar, SS hastalarında bulunan anti-Ro ve anti-La gibi belirli otoantikorların, hem iç hem de dış yolaklar aracılığıyla apoptozu tetikleyebileceğini göstermiştir. Bu süreç, hücre yüzeyindeki Fc gama (Fcγ) reseptörleriyle etkileşim yoluyla gerçekleşir; bu etkileşimler, söz konusu otoantikorların hücre içine alınmasına ve kaspazlar, özellikle de kaspaz-3, kaspaz-8 ve kaspaz-9’un dahil olduğu apoptoz sinyal kaskadlarının aktivasyonuna yol açar.

Araştırmalar ayrıca, özellikle Dendrobium officinale kaynaklı bitkisel polisakkaritlerin A-253 hücre hattı üzerindeki etkilerini de incelemiştir; bu polisakkaritlerin, tümör nekroz faktörü-alfa (TNF-α) tarafından indüklenen apoptoza karşı potansiyel koruyucu etkileri olduğu gösterilmiştir. Bu polisakkaritlerle ön işlemden geçirildiğinde, A-253 hücrelerinde TNF-α'nın indüklediği apoptotik belirteçlerde azalma gözlenmiştir; örneğin, reaktif oksijen türleri (ROS) üretiminde azalma, mitokondriyal membran potansiyelinin korunması ve nükleer faktör-kappa B'nin (NF-κB) çekirdeğe translokasyonunda azalma gibi. Bu gözlemler, bu tür polisakkaritlerin tükürük bezlerinde bağışıklık kaynaklı hasarı hafifletmede ve aşırı apoptozun bez fonksiyon bozukluğuna ve iltihaplanmaya katkıda bulunduğu SS gibi otoimmün hastalıklar için yeni bir tedavi yaklaşımı sağlamada potansiyel bir rol oynadığını göstermektedir.

Genel olarak, A-253 hücreleri, tükürük bezi hücrelerinin apoptozunu ve otoimmün tükürük bezi hasarının altında yatan moleküler mekanizmaları anlamak için önemli bir model görevi görür. Bu, hem Sjögren sendromunda hem de epitel hücrelerinin dayanıklılığı ve bağışıklık etkileşimlerine yönelik daha geniş kapsamlı araştırmalarda önemli olan kaspaz aktivasyonu, mitokondriyal dengesizleşme ve proinflamatuar sitokin etkilerinin incelenmesini de içermektedir.

Doku
Submandibular bezler
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
  • A 253
  • A253

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde ve antitimosit serumu ile tedavi edilmiş yeni doğmuş farelerde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
A-253 (Cytion katalog numarası 305524)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1060

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
McCoys 5a, w: 3.0 g/L Glukoz, w: stabil Glutamin, w: 2.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820200a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2-4*10⁴/cm²
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
54 yıl
Etnik köken
Avrupa