الانتقال إلى المحتوى
A-253
الأنسجة
الغدد تحت الفك السفلي
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية
المرادفات
A 253, A253

المستندات

A-253

Cell line · رقم المنتج 305524

The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا A-253 هي سلسلة خلايا ظهارية بشرية مستمدة من ورم سرطاني بشري الشكل في الغدة اللعابية تحت الفك السفلي. ويُستخدم هذا النموذج الخلوي على نطاق واسع لدراسة الفيزيولوجيا المرضية للغدد اللعابية، لا سيما في سياق الأمراض المناعية الذاتية مثل متلازمة سجوجرن (SS). متلازمة سجوجرن (SS) هي مرض مناعي ذاتي مزمن يؤثر على الغدد الإفرازية الخارجية، مما يؤدي إلى ظهور أعراض جفاف الفم (xerostomia) وجفاف العينين (التهاب القرنية والملتحمة الجاف)، بالإضافة إلى تلف الأنسجة الغدية. في خلايا A-253، أظهرت الدراسات أن بعض الأجسام المضادة الذاتية الموجودة لدى مرضى متلازمة سجوجرن، مثل الأجسام المضادة لـ Ro والأجسام المضادة لـ La، يمكن أن تحفز موت الخلايا المبرمج (أبوبتوسيس) عبر مسارات داخلية وخارجية على حد سواء. ويحدث ذلك من خلال التفاعلات مع مستقبلات Fc غاما (Fcγ) الموجودة على سطح الخلية، مما يؤدي إلى استيعاب هذه الأجسام المضادة الذاتية وتفعيل تسلسلات إشارات موت الخلايا المبرمج التي تشمل الكاسبازات، وتحديدًا الكاسباز-3 والكاسباز-8 والكاسباز-9.

كما استكشفت الأبحاث تأثيرات السكريات العشبية على سلالة الخلايا A-253، ولا سيما تلك المستخلصة من نبات Dendrobium officinale، والتي أظهرت تأثيرات وقائية محتملة ضد موت الخلايا المبرمج الذي يسببه عامل نخر الورم ألفا (TNF-α). وعند المعالجة المسبقة بهذه السكريات، تُظهر خلايا A-253 انخفاضًا في علامات موت الخلايا المبرمج الناجم عن عامل نخر الورم ألفا (TNF-α)، مثل انخفاض إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS)، والحفاظ على جهد غشاء الميتوكوندريا، وانخفاض انتقال العامل النووي كابا ب (NF-κB) إلى النواة. تشير هذه الملاحظات إلى دور محتمل لهذه السكريات المتعددة في التخفيف من الأضرار المرتبطة بالمناعة في الغدد اللعابية، وفي توفير منظور علاجي جديد لأمراض المناعة الذاتية مثل متلازمة شيجن (SS)، حيث يسهم الموت الخلوي المبرمج المفرط في خلل وظيفي في الغدد والالتهاب.

بشكل عام، تُعد خلايا A-253 نموذجًا مهمًا لفهم موت الخلايا المبرمج لخلايا الغدد اللعابية والآليات الجزيئية الكامنة وراء تلف الغدد اللعابية المناعي الذاتي. ويشمل ذلك دراسة تنشيط الكاسباز، وزعزعة استقرار الميتوكوندريا، وتأثيرات السيتوكينات المحفزة للالتهاب، وهي أمور ذات صلة بكل من متلازمة سجوجرن والأبحاث الأوسع نطاقًا حول مرونة الخلايا الظهارية والتفاعلات المناعية.

الأنسجة
الغدد تحت الفك السفلي
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية
المرادفات
  • A 253
  • A253

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية والفئران حديثة الولادة التي عولجت بمصل مضاد للخلايا التيمية

04المعرّفات

المرجع
A-253 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305524)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1060

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
مكويز 5 أ، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820200 أ)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
2-4*10^4/سم²
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
54 سنة
الأصل العرقي
أوروبي