A-253
Cell line · Tuotenumero 305524
The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...
Räätälöinti / Suositukset
- A-253Cell line€550.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
A-253-solulinja on ihmisen epiteelisolulinja, joka on peräisin submaxillaarisen sylkirauhasen epidermoidikarsinoomasta. Tätä solumallia käytetään laajalti sylkirauhasten patofysiologian tutkimiseen, erityisesti autoimmuunisairauksien, kuten Sjögrenin oireyhtymän (SS), yhteydessä. SS on krooninen autoimmuunisairaus, joka vaikuttaa eksokriinisiin rauhasiin ja aiheuttaa suun kuivumista (kserostomia) ja silmien kuivumista (keratokonjunktiviitti sicca) sekä rauhaskudoksen vaurioita. A-253-soluissa tehdyt tutkimukset ovat osoittaneet, että tietyt SS-potilailla esiintyvät autoantit, kuten anti-Ro ja anti-La, voivat laukaista apoptoosin sekä sisäisten että ulkoisten reittien kautta. Tämä tapahtuu vuorovaikutusten kautta solupinnalla olevien Fc-gamma (Fcγ)-reseptorien kanssa, mikä johtaa näiden autoantigeenivasta-aineiden sisäistymiseen ja apoptoottisten signaalikaskadien aktivoitumiseen, joissa mukana ovat kaspaasit, erityisesti kaspaasi-3, kaspaasi-8 ja kaspaasi-9.
Tutkimuksissa on myös selvitetty kasviperäisten polysakkaridien, erityisesti Dendrobium officinale -kasvista peräisin olevien, vaikutuksia A-253-solulinjaan, ja niillä on havaittu mahdollisia suojaavia vaikutuksia tuumorinekroositekijä-alfa (TNF-α) -proteiinin aiheuttamaa apoptoosia vastaan. Kun A-253-soluja esikäsitellään näillä polysakkarideilla, niissä havaitaan TNF-α:n indusoimien apoptoosimarkkerien vähenemistä, kuten reaktiivisten happiyhdisteiden (ROS) tuotannon vähenemistä, mitokondriaalisen kalvopotentiaalin säilymistä sekä ydintekijä-kappa B:n (NF-κB) siirtymisen vähenemistä tumaan. Nämä havainnot viittaavat siihen, että tällaisilla polysakkarideilla voisi olla merkitystä sylkirauhasten immuunijärjestelmään liittyvien vaurioiden lieventämisessä sekä uudenlaisen hoitokohteen tarjoamisessa autoimmuunisairauksille, kuten Sjögrenin oireyhtymälle (SS), jossa liiallinen apoptoosi edistää rauhasten toimintahäiriötä ja tulehdusta.
Kaiken kaikkiaan A-253-solut toimivat tärkeänä mallina sylkirauhassolujen apoptoosin ja autoimmuunisylkirauhavaurioiden taustalla olevien molekyylimekanismien ymmärtämisessä. Tähän sisältyy kaspaasien aktivaation, mitokondrioiden epävakauden ja proinflammatoristen sytokiinien vaikutusten tutkimus, jotka ovat merkityksellisiä sekä Sjögrenin oireyhtymän että laajemmin epiteelisolujen sietokyvyn ja immuunijärjestelmän vuorovaikutusten tutkimuksen kannalta.
- Kudos
- Leuanalaiset rauhaset
- Sairaus
- Okasolusyöpä
- Synonyymit
- A 253
- A253
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteeli
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, alastomilla hiirillä ja antitymosyyttiseerumilla käsitellyillä vastasyntyneillä hiirillä
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- A-253 (Cytion-tuotenumero 305524)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1060
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukoosia, w: vakaa glutamiini, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820200a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 2–4 × 10⁴/cm²
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 54 vuotta
- Etnisyys
- Eurooppalainen
08Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
