A-253

La linea cellulare A-253 è una linea cellulare epiteliale umana derivata da un carcinoma epidermoide della ghiandola salivare sottomascellare. Questo modello cellulare è ampiamente utilizzato per studiare la fisiopatologia delle ghiandole salivari, in particolare nel contesto di patologie autoimmuni come la sindrome di Sjögren (SS). La SS è una malattia autoimmune cronica che colpisce le ghiandole esocrine, causando sintomi quali secchezza delle fauci (xerostomia) e secchezza oculare (cheratocongiuntivite secca), oltre a danni al tessuto ghiandolare. Nelle cellule A-253, alcuni studi hanno dimostrato che determinati autoanticorpi presenti nei pazienti affetti da SS, quali gli anti-Ro e gli anti-La, possono innescare l’apoptosi sia attraverso vie intrinseche che estrinseche. Ciò avviene tramite interazioni con i recettori Fc gamma (Fcγ) presenti sulla superficie cellulare, portando all’internalizzazione di questi autoanticorpi e all’attivazione di cascate di segnalazione apoptotiche che coinvolgono le caspasi, in particolare la caspasi-3, la caspasi-8 e la caspasi-9.

La ricerca ha inoltre esaminato gli effetti dei polisaccaridi di origine vegetale sulla linea cellulare A-253, in particolare quelli derivati dal Dendrobium officinale, che hanno mostrato potenziali effetti protettivi contro l’apoptosi indotta dal fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-α). Quando pretrattate con questi polisaccaridi, le cellule A-253 mostrano una riduzione dei marcatori apoptotici indotti dal TNF-α, quali una diminuzione della produzione di specie reattive dell’ossigeno (ROS), il mantenimento del potenziale di membrana mitocondriale e una ridotta traslocazione del fattore nucleare kappa B (NF-κB) nel nucleo. Queste osservazioni suggeriscono un potenziale ruolo di tali polisaccaridi nell’attenuare il danno di origine immunitaria nelle ghiandole salivari e nel fornire una nuova prospettiva terapeutica per malattie autoimmuni come la sindrome di Sjögren (SS), in cui l’eccessiva apoptosi contribuisce alla disfunzione ghiandolare e all’infiammazione.

Nel complesso, le cellule A-253 fungono da importante modello per comprendere l’apoptosi delle cellule delle ghiandole salivari e i meccanismi molecolari alla base del danno autoimmune alle ghiandole salivari. Ciò include lo studio dell’attivazione delle caspasi, della destabilizzazione mitocondriale e degli effetti delle citochine pro-infiammatorie, che sono rilevanti sia nella sindrome di Sjögren sia in indagini più ampie sulla resilienza delle cellule epiteliali e sulle interazioni immunitarie.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia