Gå direkt till innehållet
A-253
Vävnad
Submandibulära körtlar
Sjukdom
Skivepitelcancer
Synonymer
A 253, A253

A-253

Cell line · Produktnummer 305524

The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...

€550.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen A-253 är en human epitelcellinje som härrör från ett epidermoidkarcinom i den submaxillära spottkörteln. Denna cellmodell används i stor utsträckning för att studera spottkörtlarnas patofysiologi, särskilt i samband med autoimmuna tillstånd som Sjögrens syndrom (SS). SS är en kronisk autoimmun sjukdom som drabbar de exokrina körtlarna och leder till symtom som muntorrhet (xerostomi) och torra ögon (keratokonjunktivit sicca), samt skador på körtelvävnaden. Studier på A-253-celler har visat att vissa autoantikroppar som förekommer hos SS-patienter, såsom anti-Ro och anti-La, kan utlösa apoptos via både intrinsiska och extrinsiska signalvägar. Detta sker genom interaktioner med Fc-gamma (Fcγ)-receptorer på cellytan, vilket leder till att dessa autoantikroppar tas upp i cellen och aktiverar apoptotiska signalkaskader som involverar kaspaser, särskilt kaspas-3, kaspas-8 och kaspas-9.

Forskningen har även undersökt effekterna av växtbaserade polysackarider på cellinjen A-253, särskilt från Dendrobium officinale, vilket har visat potentiella skyddande effekter mot apoptos inducerad av tumörnekrosfaktor-alfa (TNF-α). Vid förbehandling med dessa polysackarider uppvisar A-253-cellerna en minskning av TNF-α-inducerade apoptosmarkörer, såsom minskad produktion av reaktiva syreföreningar (ROS), bevarad mitokondriell membranpotential och minskad translokation av nukleär faktor-kappa B (NF-κB) till cellkärnan. Dessa observationer tyder på att sådana polysackarider kan spela en roll för att mildra immunrelaterade skador i salivkörtlarna och erbjuda en ny terapeutisk infallsvinkel för autoimmuna sjukdomar som SS, där överdriven apoptos bidrar till körteldysfunktion och inflammation.

Sammantaget fungerar A-253-celler som en viktig modell för att förstå apoptos i spottkörtelceller och de molekylära mekanismerna som ligger till grund för autoimmuna skador på spottkörtlarna. Detta innefattar studier av kaspasaktivering, mitokondriell destabilisering och effekter av proinflammatoriska cytokiner, vilket är relevant både vid Sjögrens syndrom och i bredare undersökningar av epitelcellers motståndskraft och immuninteraktioner.

Vävnad
Submandibulära körtlar
Sjukdom
Skivepitelcancer
Synonymer
  • A 253
  • A253

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Tumörframkallande
Ja, hos nakenmöss och hos nyfödda möss som behandlats med antitymocyt-serum

04Identifierare

Källa
A-253 (Cytion-katalognummer 305524)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1060

05Hantering och odling

Odlingsmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukos, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
2–4 × 10⁴/cm²
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
54 år
Etnicitet
Europeiska