A-253

La línea celular A-253 es una línea celular epitelial humana derivada de un carcinoma epidermoide de la glándula salival submaxilar. Este modelo celular se utiliza ampliamente para estudiar la fisiopatología de las glándulas salivales, especialmente en el contexto de afecciones autoinmunes como el síndrome de Sjögren (SS). El SS es una enfermedad autoinmune crónica que afecta a las glándulas exocrinas, lo que provoca síntomas de boca seca (xerostomía) y ojos secos (queratoconjuntivitis seca), así como daño al tejido glandular. En las células A-253, los estudios han demostrado que ciertos autoanticuerpos presentes en pacientes con SS, como los anti-Ro y anti-La, pueden desencadenar la apoptosis a través de vías tanto intrínsecas como extrínsecas. Esto ocurre mediante interacciones con los receptores Fc gamma (Fcγ) en la superficie celular, lo que conduce a la internalización de estos autoanticuerpos y a la activación de cascadas de señalización apoptótica que involucran a las caspasas, específicamente la caspasa-3, la caspasa-8 y la caspasa-9.

Las investigaciones también han explorado los efectos de los polisacáridos de origen herbal en la línea celular A-253, particularmente los de Dendrobium officinale, que han demostrado posibles efectos protectores contra la apoptosis inducida por el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α). Cuando se les aplica un tratamiento previo con estos polisacáridos, las células A-253 muestran una reducción en los marcadores de apoptosis inducida por el TNF-α, como una disminución en la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS), la preservación del potencial de la membrana mitocondrial y una reducción en la translocación del factor nuclear kappa B (NF-κB) al núcleo. Estas observaciones sugieren un papel potencial de dichos polisacáridos en la mitigación del daño relacionado con el sistema inmunológico en las glándulas salivales y en proporcionar un nuevo enfoque terapéutico para enfermedades autoinmunes como el síndrome de Sjögren (SS), en el que la apoptosis excesiva contribuye a la disfunción glandular y a la inflamación.

En general, las células A-253 sirven como un modelo importante para comprender la apoptosis de las células de las glándulas salivales y los mecanismos moleculares que subyacen al daño autoinmune en las glándulas salivales. Esto incluye el estudio de la activación de las caspasas, la desestabilización mitocondrial y los efectos de las citocinas proinflamatorias, que son relevantes tanto en el síndrome de Sjögren como en investigaciones más amplias sobre la resiliencia de las células epiteliales y las interacciones inmunitarias.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.