Gå direkte til indholdet
A-253
Væv
Submandibulære kirtler
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
A 253, A253

Dokumenter

A-253

Cell line · Varenummer 305524

The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

A-253-cellelinjen er en human epitelcellelinje, der stammer fra et epidermoidkarcinom i den submaxillære spytkirtel. Denne cellemodel anvendes i vid udstrækning til at undersøge spytkirtlernes patofysiologi, især i forbindelse med autoimmune tilstande som Sjögrens syndrom (SS). SS er en kronisk autoimmun sygdom, der påvirker de eksokrine kirtler og medfører symptomer som mundtørhed (xerostomi) og tørre øjne (keratokonjunktivitis sicca) samt beskadigelse af kirtelvævet. Undersøgelser af A-253-celler har vist, at visse autoantistoffer, der forekommer hos SS-patienter, såsom anti-Ro og anti-La, kan udløse apoptose via både intrinsiske og ekstrinsiske signalveje. Dette sker via interaktioner med Fc-gamma (Fcγ)-receptorer på celleoverfladen, hvilket fører til internalisering af disse autoantistoffer og aktivering af apoptotiske signalkaskader, der involverer caspaser, specifikt caspase-3, caspase-8 og caspase-9.

Forskningen har også undersøgt virkningerne af plantepolysaccharider på A-253-cellelinjen, især fra Dendrobium officinale, som har vist potentielle beskyttende effekter mod apoptose induceret af tumornekrosefaktor-alfa (TNF-α). Når A-253-cellerne forbehandles med disse polysaccharider, udviser de en reduktion i TNF-α-inducerede apoptotiske markører, såsom nedsat produktion af reaktive iltarter (ROS), bevaret mitokondrie-membranpotentiale og reduceret translokation af nuklearfaktor-kappa B (NF-κB) til cellekernen. Disse observationer tyder på, at sådanne polysaccharider kan spille en rolle i at afbøde immunrelateret skade i spytkirtlerne og udgøre et nyt terapeutisk perspektiv for autoimmune sygdomme som SS, hvor overdreven apoptose bidrager til kirteldysfunktion og betændelse.

Samlet set fungerer A-253-celler som en vigtig model til forståelse af apoptose i spytkirtelceller og de molekylære mekanismer, der ligger til grund for autoimmun skade på spytkirtlerne. Dette omfatter undersøgelsen af caspase-aktivering, mitokondrie-destabilisering og proinflammatoriske cytokin-effekter, som er relevante både i forbindelse med Sjögrens syndrom og i bredere undersøgelser af epitelcellers modstandsdygtighed og immuninteraktioner.

Væv
Submandibulære kirtler
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
  • A 253
  • A253

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial
Tumorfremkaldende
Ja, hos nude-mus og hos nyfødte mus, der er blevet behandlet med anti-thymocyt-serum

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A-253 (Cytion-katalognummer 305524)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1060

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukose, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2–4 × 10⁴/cm²
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
54 år
Etnisk tilhørsforhold
Europæisk