Перейти до вмісту
A-253
Тканина
Підщелепні залози
Хвороба
Плоскоклітинний рак
Синоніми
A 253, A253

Документи

A-253

Cell line · Номер товару 305524

The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...

€550.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія A-253 — це лінія епітеліальних клітин людини, отримана з епідермоїдної карциноми підщелепної слинної залози. Ця клітинна модель широко використовується для вивчення патофізіології слинних залоз, особливо в контексті аутоімунних захворювань, таких як синдром Шегрена (СС). СС — це хронічне аутоімунне захворювання, що уражає екзокринні залози та призводить до таких симптомів, як сухість у роті (ксеростомія) та сухість очей (сухий кератокон’юнктивіт), а також до ураження залозистої тканини. Дослідження клітин A-253 показали, що певні аутоантитіла, присутні у пацієнтів із СШ, такі як анти-Ro та анти-La, можуть індукувати апоптоз як через внутрішні, так і через зовнішні шляхи. Це відбувається через взаємодію з Fc-гамма (Fcγ)-рецепторами на поверхні клітини, що призводить до інтерналізації цих аутоантитіл та активації апоптотичних сигнальних каскадів за участю каспаз, зокрема каспази-3, каспази-8 та каспази-9.

У ході досліджень також вивчався вплив рослинних полісахаридів на клітинну лінію A-253, зокрема полісахаридів Dendrobium officinale, які продемонстрували потенційний захисний ефект проти апоптозу, індукованого фактором некрозу пухлин-альфа (TNF-α). При попередній обробці цими полісахаридами клітини A-253 демонструють зниження рівня маркерів апоптозу, індукованих TNF-α, таких як зменшення утворення активних форм кисню (АФК), збереження потенціалу мітохондріальної мембрани та зменшення транслокації ядерного фактора каппа-B (NF-κB) до ядра. Ці спостереження вказують на потенційну роль таких полісахаридів у пом’якшенні імуноопосередкованого ураження слинних залоз та у створенні нового терапевтичного підходу до лікування аутоімунних захворювань, таких як синдром Шегрена (SS), де надмірний апоптоз сприяє дисфункції залоз та запаленню.

Загалом клітини A-253 слугують важливою моделлю для розуміння апоптозу клітин слинних залоз та молекулярних механізмів, що лежать в основі аутоімунного ураження слинних залоз. Це включає дослідження активації каспаз, дестабілізації мітохондрій та впливу прозапальних цитокінів, що є актуальним як для синдрому Шегрена, так і для більш широких досліджень стійкості епітеліальних клітин та імунних взаємодій.

Тканина
Підщелепні залози
Хвороба
Плоскоклітинний рак
Синоніми
  • A 253
  • A253

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальний
Пухлиноутворювальний
Так, у голих мишей та у новонароджених мишей, яким вводили сироватку, що пригнічує тимоцити

04Ідентифікатори

Посилання
A-253 (номер у каталозі Cytion 305524)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1060

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
McCoys 5a, w: 3,0 г/л Глюкоза, w: стабільна Глютамін, w: 2,0 мМ Піруват натрію, w: 2,2 г/л NaHCO3 (Cytion article number 820200a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
2–4 × 10⁴/см²
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
54 роки
Етнічна приналежність
Європейський