Skip to content
A-253
Tissue
בלוטות תת-לסתיות
Disease
קרצינומה של תאי קשקש
Synonyms
A 253, A253

Documents

A-253

Cell line · Product number 305524

The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...

US$540.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים A-253 הוא קו תאים אפיתליאלי אנושי שמקורו בקרצינומה אפידרמואידית של בלוטת הרוק התת-לסתית. מודל תאי זה נמצא בשימוש נרחב לחקר הפתופיזיולוגיה של בלוטות הרוק, במיוחד בהקשר של מחלות אוטואימוניות כגון תסמונת סיוגרן (SS). תסמונת סיוגרן (SS) היא מחלה אוטואימונית כרונית הפוגעת בבלוטות האקסוקריניות, וגורמת לתסמינים של יובש בפה (קסרוסטומיה) ויובש בעיניים (קרטוקונג'ונקטיביטיס סיקה), וכן לנזק ברקמת הבלוטות. מחקרים בתאי A-253 הראו כי נוגדנים עצמיים מסוימים הקיימים בחולי SS, כגון נוגדני אנטי-Ro ואנטי-La, יכולים לעורר אפופטוזיס הן באמצעות מסלולים פנימיים והן באמצעות מסלולים חיצוניים. תהליך זה מתרחש באמצעות אינטראקציות עם קולטני Fc גמא (Fcγ) על פני התא, מה שמוביל לאינטרינליזציה של נוגדנים עצמיים אלה ולהפעלת שרשראות איתות אפופטוטיות הכוללות קספאזות, ובפרט קספאזה-3, קספאזה-8 וקספאזה-9.

מחקרים בחנו גם את ההשפעות של פוליסכרידים צמחיים על קו התאים A-253, במיוחד אלה שמקורם ב-Dendrobium officinale, שהראו השפעות מגנות פוטנציאליות כנגד אפופטוזיס המושרה על ידי גורם נמק הגידול-אלפא (TNF-α). כאשר טופלו מראש בפוליסכרידים אלה, תאי A-253 הראו ירידה בסמנים אפופטוטיים המושרים על ידי TNF-α, כגון ירידה בייצור מינים תגובתיים של חמצן (ROS), שימור פוטנציאל קרום המיטוכונדריה וירידה במעבר של הגורם הגרעיני קאפה B (NF-κB) אל הגרעין. תצפיות אלו מצביעות על תפקיד פוטנציאלי של פוליסכרידים מסוג זה בהפחתת הנזק הקשור למערכת החיסון בבלוטות הרוק, ובמתן גישה טיפולית חדשנית למחלות אוטואימוניות כגון תסמונת סיוגרן (SS), שבה אפופטוזיס מוגבר תורם לתפקוד לקוי של הבלוטות ולדלקת.

בסך הכל, תאי A-253 משמשים כמודל חשוב להבנת האפופטוזיס בתאי בלוטות הרוק והמנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס הנזק האוטואימוני לבלוטות הרוק. זה כולל את חקר הפעלת הקספאז, חוסר היציבות המיטוכונדריאלית והשפעות הציטוקינים הפרו-דלקתיים, הרלוונטיים הן בתסמונת סיוגרן והן במחקרים רחבים יותר על חוסן תאי האפיתל ועל האינטראקציות החיסוניות.

Tissue
בלוטות תת-לסתיות
Disease
קרצינומה של תאי קשקש
Synonyms
  • A 253
  • A253

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים ובעכברים שזה עתה נולדו שטופלו בסרום נגד תאי תימוס

04Identifiers

Citation
A-253 (מספר קטלוג Cytion 305524)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1060

05Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
2–4*10^4/סמ"ר
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
54 שנים
Ethnicity
אירופאי