Přejít na obsah
A-253
Tkáň
Podčelistní žlázy
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom
Synonyma
A 253, A253

Dokumenty

A-253

Cell line · Číslo výrobku 305524

The A-253 cell line is a human epithelial cell line derived from an epidermoid carcinoma of the submaxillary salivary gland. This cell model is widely use...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie A-253 je lidská epiteliální buněčná linie odvozená z epidermoidního karcinomu submaxilární slinné žlázy. Tento buněčný model se široce používá ke studiu patofyziologie slinných žláz, zejména v souvislosti s autoimunitními onemocněními, jako je Sjögrenův syndrom (SS). SS je chronické autoimunitní onemocnění postihující exokrinní žlázy, které vede k příznakům sucha v ústech (xerostomie) a suchých očí (keratokonjunktivitida sicca), jakož i k poškození žlázové tkáně. Studie na buňkách A-253 ukázaly, že určité autoprotilátky přítomné u pacientů s SS, jako jsou anti-Ro a anti-La, mohou spouštět apoptózu jak prostřednictvím vnitřních, tak vnějších signálních drah. K tomu dochází prostřednictvím interakcí s Fc-gamma (Fcγ) receptory na buněčném povrchu, což vede k internalizaci těchto autoprotilátek a aktivaci apoptotických signálních kaskád zahrnujících kaspázy, konkrétně kaspázu-3, kaspázu-8 a kaspázu-9.

Výzkum se rovněž zabýval účinky rostlinných polysacharidů na buněčnou linii A-253, zejména z druhu Dendrobium officinale, které prokázaly potenciální ochranné účinky proti apoptóze indukované faktorem nekrózy nádorů alfa (TNF-α). Při předběžné léčbě těmito polysacharidy vykazují buňky A-253 snížení markerů apoptózy indukované TNF-α, jako je snížená produkce reaktivních forem kyslíku (ROS), zachovaný potenciál mitochondriální membrány a snížená translokace jaderného faktoru kappa B (NF-κB) do jádra. Tyto pozorování naznačují potenciální roli těchto polysacharidů při zmírňování imunitně podmíněného poškození slinných žláz a při poskytování nového terapeutického přístupu k autoimunitním onemocněním, jako je SS, u nichž nadměrná apoptóza přispívá k dysfunkci žláz a zánětu.

Celkově slouží buňky A-253 jako důležitý model pro pochopení apoptózy buněk slinných žláz a molekulárních mechanismů, které jsou základem autoimunitního poškození slinných žláz. To zahrnuje studium aktivace kaspáz, destabilizace mitochondrií a účinků prozánětlivých cytokinů, které jsou relevantní jak pro Sjögrenův syndrom, tak pro širší výzkum odolnosti epitelových buněk a imunitních interakcí.

Tkáň
Podčelistní žlázy
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom
Synonyma
  • A 253
  • A253

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové
Tumorogenní
Ano, u nahých myší a u novorozených myší ošetřených sérem proti tymocytům

04Identifikátory

Citace
A-253 (katalogové číslo Cytion 305524)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1060

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilní glutamin, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
54 let
Etnická příslušnost
Evropská