A-253

A-253 šūnu līnija ir cilvēka epitēlija šūnu līnija, kas iegūta no zemžokļa siekalu dziedzera epidermoidālas karcinomas. Šo šūnu modeli plaši izmanto siekalu dziedzeru patofizioloģijas pētīšanai, jo īpaši saistībā ar autoimūnām slimībām, piemēram, Šēgrēna sindromu (SS). SS ir hroniska autoimūna slimība, kas skar eksokrīnās dziedzerus, izraisot mutvārdu sausuma (kserostomijas) un acu sausuma (keratokonjunktivīta sicca) simptomus, kā arī dziedzeru audu bojājumus. Pētījumos ar A-253 šūnām ir pierādīts, ka noteiktas autoantivielas, kas sastopamas SS pacientiem, piemēram, anti-Ro un anti-La, var izraisīt apoptozi gan caur iekšējiem, gan ārējiem signālu ceļiem. Tas notiek, mijiedarbojoties ar Fc gamma (Fcγ) receptoriem uz šūnu virsmas, kas izraisa šo autoantivielu internalizāciju un apoptozes signālkaskāžu aktivizēšanu, kurās iesaistās kaspāzes, konkrēti kaspāze-3, kaspāze-8 un kaspāze-9.

Pētījumos ir izpētīta arī augu izcelsmes polisaharīdu ietekme uz A-253 šūnu līniju, jo īpaši no Dendrobium officinale, kuriem ir novērota potenciāla aizsargājoša iedarbība pret apoptozi, ko izraisa audzēja nekrozes faktors-alfa (TNF-α). Ja A-253 šūnas iepriekš apstrādā ar šiem polisaharīdiem, tajās novēro samazinājumu TNF-α izraisītajos apoptozes marķieros, piemēram, samazinātu reaktīvo skābekļa savienojumu (ROS) veidošanos, saglabātu mitohondriju membrānas potenciālu un samazinātu kodola faktora kappa B (NF-κB) translokāciju uz kodolu. Šie novērojumi liecina par šādu polisaharīdu potenciālo lomu imūnsistēmai saistītu bojājumu mazināšanā siekalu dziedzeros un jauna terapeitiskā pieejas nodrošināšanā autoimūnām slimībām, piemēram, Sjogrena sindromam (SS), kur pārmērīga apoptoze veicina dziedzeru disfunkciju un iekaisumu.

Kopumā A-253 šūnas kalpo kā svarīgs modelis, lai izprastu siekalu dziedzeru šūnu apoptozi un molekulāros mehānismus, kas ir autoimūno siekalu dziedzeru bojājumu pamatā. Tas ietver kaspāžu aktivācijas, mitohondriju destabilizācijas un proinflamatorisko citokīnu ietekmes pētījumus, kas ir nozīmīgi gan Sjögrēna sindroma gadījumā, gan plašākos pētījumos par epitēlija šūnu izturību un imūnsistēmas mijiedarbību.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu