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IHH-4
Tessuto
Ghiandola tiroidea
Malattia
Carcinoma papillare della ghiandola tiroidea
Sito metastatico
Linfonodo cervicale sinistro
Sinonimi
IHH4

Documenti

IHH-4

Cell line · Codice prodotto 305448

The IHH-4 cell line is derived from papillary thyroid carcinoma (PTC), the most prevalent form of thyroid cancer, which frequently exhibits aggressive cha...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare IHH-4 deriva dal carcinoma papillare della tiroide (PTC), la forma più diffusa di cancro della tiroide, che spesso presenta caratteristiche aggressive, tra cui invasione e metastasi. IHH-4 è stato utilizzato in numerosi studi volti a chiarire i meccanismi molecolari alla base della progressione del PTC. Questa linea cellulare è particolarmente nota per il suo ruolo negli studi sulla transizione epitelio-mesenchimale (EMT), un processo che aumenta il potenziale invasivo delle cellule tumorali. Ad esempio, è stato dimostrato che le cellule IHH-4, insieme ad altre linee di PTC, esprimono livelli elevati di metalloproteinasi-9 della matrice (MMP-9), una proteasi che svolge un ruolo critico nella degradazione della matrice extracellulare e facilita l'invasione tumorale e le metastasi. L'inibizione della MMP-9 nelle cellule IHH-4 è risultata in grado di ridurre i marcatori EMT e di ostacolare la migrazione e l'invasione cellulare.

Le ricerche condotte sulla linea cellulare IHH-4 hanno anche esaminato il ruolo dei fattori di trascrizione come il fattore 4 delle cellule T (TCF4) e gli RNA lunghi non codificanti (lncRNA) nel PTC. Gli studi hanno evidenziato che TCF4 è sovraespresso nelle cellule IHH-4 e può regolare l'espressione del lncRNA HCP5, che a sua volta modula diversi microRNA correlati alla progressione tumorale. L'eliminazione di TCF4 nelle cellule IHH-4 ha dimostrato di ridurre la proliferazione e l'invasione cellulare, suggerendo che TCF4 è un regolatore centrale delle vie oncogeniche nel PTC.

Nel complesso, l'IHH-4 funge da modello prezioso per lo studio delle vie molecolari e cellulari legate al cancro della tiroide, in particolare quelle che guidano l'invasione delle cellule tumorali, le metastasi e la resistenza alle terapie. Le conoscenze acquisite grazie alla ricerca sull'IHH-4 contribuiscono allo sviluppo di potenziali strategie terapeutiche per combattere i tumori tiroidei aggressivi.

Tessuto
Ghiandola tiroidea
Malattia
Carcinoma papillare della ghiandola tiroidea
Sito metastatico
Linfonodo cervicale sinistro
Sinonimi
  • IHH4

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This human thyroid papillary carcinoma cell line (IHH-4) contains undefined stable modifications consistent with tumor-derived immortalization. No infectious virus is produced. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
IHH-4 (numero di catalogo Cytion 305448)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2960

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: AKT1, p.Glu17Lys (c.49G>A), eterozigote; Mutazione: BRAF, p.Val600Glu (c.1799T>A), eterozigote; Mutazione: CREBBP, p.Trp592Ter (c.1776G>A), eterozigote; Mutazione: CRLF2, p.Trp255Ter (c.765G>A), eterozigote; Mutazione: EP300, p.Arg1312Ter (c.3934C>T), eterozigote; Mutazione: RAC1, p.Asp11Glu (c.33C>G), eterozigote; Mutazione: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T), eterozigote

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
miscela 1 a 1 di terreno Dulbecco's modified Eagle's medium (numero articolo Cytion 820300a) e terreno RPMI1640 (numero articolo Cytion 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
75 anni
Etnia
Giapponese