Pereiti prie turinio
CESS ląstelės
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Ūminė mieloidinė leukemija
Sinonimai
Cess

Dokumentai

CESS ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300262

CESS ląstelių linija yra B limfoblastoidinė ląstelių linija, gauta iš žmogaus, sergančio leukemija. Ši ląstelių linija dažniausiai naudojama imunoglobulino pro...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

CESS ląstelių linija yra B limfoblastoidinių ląstelių linija, gauta iš leukemija sergančio žmogaus. Ši ląstelių linija paprastai naudojama tiriant imunoglobulinų gamybą, ypač IgG sekreciją, nes stipriai reaguoja į citokinų stimuliaciją. CESS ląstelės yra transformuotos EBV ir turi brandžioms B ląstelėms būdingų paviršiaus žymenų, tokių kaip CD19 ir CD38. Jos išreiškia sIgG1 klasės imunoglobulinus ir yra B ląstelių diferenciacijos ir funkcijos tyrimo modelis, įskaitant imuninius atsakus, reguliuojamus tokių citokinų kaip interleukinas-6 (IL-6), taip pat žinomas kaip B ląstelių stimuliacijos faktorius 2 (BSF-2). IL-6 atlieka lemiamą vaidmenį skatinant imunoglobulinų gamybą CESS ląstelėse, todėl jos yra vertingas modelis B ląstelių reakcijoms imunologiniuose tyrimuose tirti.

Be to, CESS ląstelės buvo naudingos atliekant tyrimus, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama ląstelių signalizacijai ir apoptozei. Ypač svarbu tai, kad šios ląstelės gamina nervų augimo faktorių (NGF) ir reaguoja į jį naudodamos autokrininį signalinį mechanizmą, išreiškiantį tiek didelio, tiek mažo afiniteto NGF receptorius. NGF signalo blokavimas antikūnais arba specifiniais inhibitoriais sukelia CESS ląstelių apoptozę, kuriai būdingas Bcl-2 fosforilinimas ir p38 MAPK kelio aktyvinimas. Dėl to CESS ląstelės yra svarbus modelis B ląstelių išgyvenimo ir apoptozės molekuliniams mechanizmams suprasti, ypač atsižvelgiant į NGF signalą ir jo reguliavimą Bcl-2 šeimos baltymais.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Ūminė mieloidinė leukemija
Paraiškos
Žmogaus T hibridomų ląstelių linijų sukūrimas
Sinonimai
  • Cess

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Limfoblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
CESS (Cytion katalogo numeris 300262)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0209

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
Transformuota dėl EBV
Produktai
IL-2 po indukcijos TRF (T ląsteles pakeičiančiu faktoriumi)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
Rekomenduojama 1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Leiskite ląstelėms atsigauti po šaldymo proceso bent 48 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Etninė priklausomybė
Europos