Gå til innholdet
CESS-celler
Vev
Perifert blod
Sykdom
Akutt myeloid leukemi
Synonymer
Cess

Dokumenter

CESS-celler

Cell line · Produktnummer 300262

CESS-cellelinjen er en B-lymfoblastoid cellelinje som stammer fra en pasient med leukemi. Denne cellelinjen brukes ofte til å studere immunoglobulinpro...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

CESS-cellelinjen er en B-lymfoblastoid cellelinje som stammer fra en human pasient med leukemi. Denne cellelinjen brukes ofte til å studere immunglobulinproduksjon, spesielt IgG-sekresjon, på grunn av dens sterke respons på cytokinstimulering. CESS-celler er EBV-transformerte og har overflatemarkører som er karakteristiske for modne B-celler, for eksempel CD19 og CD38. De uttrykker sIgG1-klassen av immunglobuliner og fungerer som en modell for å studere B-celledifferensiering og -funksjon, inkludert immunresponser som reguleres av cytokiner som interleukin-6 (IL-6), også kjent som B-celle-stimuleringsfaktor 2 (BSF-2). IL-6 spiller en avgjørende rolle i stimuleringen av immunglobulinproduksjonen i CESS-celler, noe som gjør dem til en verdifull modell for å undersøke B-celleresponser i immunologisk forskning.

I tillegg har CESS-celler vært sentrale i studier med fokus på cellesignalering og apoptose. Det har vist seg at disse cellene produserer og reagerer på nervevekstfaktor (NGF) gjennom en autokrin signalmekanisme, og uttrykker både høy- og lavaffinitets NGF-reseptorer. Blokkering av NGF-signalering med antistoffer eller spesifikke hemmere induserer apoptose i CESS-celler, som kjennetegnes av Bcl-2-fosforylering og aktivering av p38 MAPK-veien. Dette gjør CESS-celler til en viktig modell for å forstå de molekylære mekanismene for B-celleoverlevelse og apoptose, spesielt i sammenheng med NGF-signalering og dens regulering av Bcl-2-familiens proteiner.

Vev
Perifert blod
Sykdom
Akutt myeloid leukemi
Søknader
Etablering av humane T-hybridomcellelinjer
Synonymer
  • Cess

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CESS (Cytion-katalognummer 300262)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0209

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
Transformert av EBV
Produkter
IL-2 etter induksjon med TRF (T-celle-erstattende faktor)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2 anbefales
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
La cellene restituere seg fra fryseprosessen i minst 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Etnisitet
Europeisk