Ga naar de inhoud
CESS-cellen
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Acute myeloïde leukemie
Synoniemen
Cess

Documenten

CESS-cellen

Cell line · Productnummer 300262

De CESS-cellijn is een B-lymfoblastoïde cellijn die is afgeleid van een menselijke patiënt met leukemie. Deze cellijn wordt vaak gebruikt voor onderzoek naar immunoglobulinepro...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De CESS-cellijn is een B-lymfoblastoïde cellijn afkomstig van een menselijke patiënt met leukemie. Deze cellijn wordt vaak gebruikt om de productie van immunoglobulinen te bestuderen, met name de secretie van IgG, vanwege de sterke respons op stimulatie door cytokinen. CESS-cellen zijn EBV-getransformeerd en vertonen oppervlaktemarkers die kenmerkend zijn voor rijpe B-cellen, zoals CD19 en CD38. Ze brengen de sIgG1 klasse van immunoglobulinen tot expressie en dienen als model voor het bestuderen van B-celdifferentiatie en -functie, inclusief immuunresponsen die worden gereguleerd door cytokinen zoals interleukine-6 (IL-6), ook bekend als B-cel stimulatiefactor 2 (BSF-2). IL-6 speelt een cruciale rol bij het stimuleren van de productie van immunoglobulinen in CESS cellen, waardoor ze een waardevol model zijn voor het onderzoeken van B celresponsen in immunologisch onderzoek.

Daarnaast hebben CESS cellen een belangrijke rol gespeeld in studies die zich richten op celsignalering en apoptose. Er is met name aangetoond dat deze cellen zenuwgroeifactor (NGF) produceren en hierop reageren via een autocrien signaleringsmechanisme, waarbij ze zowel NGF-receptoren met hoge als lage affiniteit tot expressie brengen. Het blokkeren van NGF signalering met antilichamen of specifieke remmers induceert apoptose in CESS cellen, gekenmerkt door Bcl-2 fosforylering en activering van de p38 MAPK pathway. Dit maakt CESS cellen tot een belangrijk model voor het begrijpen van de moleculaire mechanismen van B celoverleving en apoptose, met name in de context van NGF signalering en de regulatie van de Bcl-2 familie eiwitten.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Acute myeloïde leukemie
Toepassingen
Ontwikkeling van humane T hybridoma cellijnen
Synoniemen
  • Cess

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Lymfoblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
CESS (Cytion catalogusnummer 300262)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0209

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Getransformeerd door EBV
Producten
IL-2 na inductie met TRF (T celvervangende factor)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 wordt aanbevolen
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Laat de cellen minstens 48 uur bijkomen van het vriesproces.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Etnische afkomst
Europese