Siirry sisältöön
CESS-kennot
Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
Akuutti myelooinen leukemia
Synonyymit
Cess

Asiakirjat

CESS-kennot

Cell line · Tuotenumero 300262

CESS-solulinja on B-lymfoblastoidinen solulinja, joka on peräisin leukemiaa sairastavalta potilaalta. Tätä solulinjaa käytetään yleisesti immunoglobuliiniproteiinien tutkimiseen...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CESS-solulinja on leukemiaa sairastavasta ihmispotilaasta peräisin oleva B-lymfoblastoidisolulinja. Tätä solulinjaa käytetään yleisesti immunoglobuliinituotannon ja erityisesti IgG:n erityksen tutkimiseen, koska se reagoi voimakkaasti sytokiinistimulaatioon. CESS-solut ovat EBV-transformoituneita, ja niissä on kypsille B-soluille tyypillisiä pintamerkkejä, kuten CD19 ja CD38. Ne ilmentävät immunoglobuliinien sIgG1-luokkaa ja toimivat mallina B-solujen erilaistumisen ja toiminnan tutkimiseen, mukaan lukien immuunivasteet, joita säätelevät sytokiinit, kuten interleukiini-6 (IL-6), joka tunnetaan myös B-solujen stimulaatiotekijänä 2 (BSF-2). IL-6:lla on ratkaiseva rooli immunoglobuliinituotannon stimuloinnissa CESS-soluissa, mikä tekee niistä arvokkaan mallin B-soluvasteiden tutkimiseen immunologisessa tutkimuksessa.

Lisäksi CESS-solut ovat olleet tärkeitä solujen signalointiin ja apoptoosiin keskittyvissä tutkimuksissa. Erityisesti näiden solujen on osoitettu tuottavan hermokasvutekijää (NGF) ja reagoivan siihen autokriinisen signalointimekanismin kautta, sillä ne ilmentävät sekä korkean että matalan affiniteetin NGF-reseptoreita. NGF:n signaloinnin estäminen vasta-aineilla tai spesifisillä inhibiittoreilla indusoi CESS-soluissa apoptoosin, jolle on ominaista Bcl-2-fosforylaatio ja p38 MAPK-reitin aktivoituminen. Tämä tekee CESS-soluista tärkeän mallin B-solujen eloonjäämisen ja apoptoosin molekyylimekanismien ymmärtämiseksi, erityisesti NGF-signaloinnin ja sen Bcl-2-perheen proteiinien säätelyn yhteydessä.

Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
Akuutti myelooinen leukemia
Sovellukset
Ihmisen T-hybridoomasolulinjojen perustaminen
Synonyymit
  • Cess

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
CESS (Cytionin luettelonumero 300262)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0209

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
EBV:n muuntama
Tuotteet
IL-2 TRF:llä (T-soluja korvaava tekijä) indusoidun induktion jälkeen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
Suositellaan 1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Anna solujen palautua pakastuksesta vähintään 48 tuntia.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Etnisyys
Eurooppalainen