Gå direkt till innehållet
CESS-celler
Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
Akut myeloisk leukemi
Synonymer
Cess

CESS-celler

Cell line · Produktnummer 300262

CESS-cellinjen är en B-lymfoblastoidcellinje som härstammar från en mänsklig patient med leukemi. Denna cellinje används ofta för att studera immunoglobulinpro...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

CESS-cellinjen är en B-lymfoblastoid cellinje som härrör från en human patient med leukemi. Denna cellinje används ofta för att studera immunoglobulinproduktion, särskilt IgG-sekretion, på grund av dess starka respons på cytokinstimulering. CESS-cellerna är EBV-transformerade och uppvisar ytmarkörer som är karakteristiska för mogna B-celler, t.ex. CD19 och CD38. De uttrycker sIgG1-klassen av immunglobuliner och fungerar som en modell för att studera B-cellers differentiering och funktion, inklusive immunsvar som regleras av cytokiner som interleukin-6 (IL-6), även känd som B-cellstimuleringsfaktor 2 (BSF-2). IL-6 spelar en avgörande roll för att stimulera immunoglobulinproduktionen i CESS-celler, vilket gör dem till en värdefull modell för att undersöka B-cellssvar inom immunologisk forskning.

Dessutom har CESS-celler varit viktiga i studier som fokuserar på cellsignalering och apoptos. Framför allt har dessa celler visat sig producera och reagera på Nerve Growth Factor (NGF) genom en autokrin signalmekanism och uttrycker NGF-receptorer med både hög och låg affinitet. Blockering av NGF-signalering med antikroppar eller specifika hämmare inducerar apoptos i CESS-celler, vilket kännetecknas av Bcl-2-fosforylering och aktivering av p38 MAPK-vägen. Detta gör CESS-celler till en viktig modell för att förstå de molekylära mekanismerna för B-cellsöverlevnad och apoptos, särskilt i samband med NGF-signalering och dess reglering av proteinerna i Bcl-2-familjen.

Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
Akut myeloisk leukemi
Ansökningar
Etablering av cellinjer för humana T-hybridom
Synonymer
  • Cess

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Upphängning
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblast

04Identifierare

Källa
CESS (Cytion katalognummer 300262)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0209

05Uttryck och mottaglighet

Virus
Transformerad av EBV
Produkter
IL-2 efter induktion med TRF (T cell-replacing factor)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2 rekommenderas
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Låt cellerna återhämta sig från frysningsprocessen i minst 48 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Etnicitet
Europeiska