Премини към съдържанието
Клетки на CESS
Тъкан
Периферна кръв
Заболяване
Остра миелоидна левкемия
Синоними
Cess

Документи

Клетки на CESS

Cell line · Номер на продукта 300262

Клетъчната линия CESS е В-лимфобластоидна клетъчна линия, получена от пациент с левкемия. Тази клетъчна линия често се използва за изследване на имуноглобулиновите про...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия CESS е В лимфобластоидна клетъчна линия, получена от човешки пациент с левкемия. Тази клетъчна линия обикновено се използва за изследване на производството на имуноглобулини, особено на IgG секреция, поради силния ѝ отговор на цитокинова стимулация. Клетките CESS са трансформирани от EBV и показват повърхностни маркери, характерни за зрелите В клетки, като CD19 и CD38. Те експресират имуноглобулините от клас sIgG1 и служат като модел за изучаване на диференциацията и функцията на В-клетките, включително имунните отговори, регулирани от цитокини като интерлевкин-6 (IL-6), известен също като фактор 2 за стимулиране на В-клетките (BSF-2). IL-6 играе решаваща роля в стимулирането на производството на имуноглобулини в клетките на CESS, което ги прави ценен модел за изследване на отговорите на В клетките в имунологичните изследвания.

Освен това клетките CESS са от съществено значение за изследвания, насочени към клетъчната сигнализация и апоптозата. По-специално, доказано е, че тези клетки произвеждат и реагират на нервния растежен фактор (NGF) чрез автокринен сигнален механизъм, като експресират както високо, така и нискоафинитетни NGF рецептори. Блокирането на NGF сигнализацията с антитела или специфични инхибитори предизвиква апоптоза в CESS клетките, характеризираща се с фосфорилиране на Bcl-2 и активиране на пътя на p38 MAPK. Това превръща клетките CESS във важен модел за разбиране на молекулярните механизми на оцеляването и апоптозата на B-клетките, особено в контекста на NGF сигнализацията и нейната регулация на протеините от семейството Bcl-2.

Тъкан
Периферна кръв
Заболяване
Остра миелоидна левкемия
Приложения
Създаване на човешки T хибридомни клетъчни линии
Синоними
  • Cess

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Лимфобласт

04Идентификатори

Източник
CESS (каталожен номер 300262 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0209

05Проява и предразположеност

Вируси
Трансформирани от EBV
Продукти
IL-2 след индукция с TRF (фактор, заместващ Т-клетките)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
Препоръчва се 1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
Оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване за поне 48 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Етническа принадлежност
Европейски