Перейти до вмісту
Вигрібні ями
Тканина
Периферична кров
Хвороба
Гострий мієлоїдний лейкоз
Синоніми
Cess

Документи

Вигрібні ями

Cell line · Номер товару 300262

Клітинна лінія CESS — це лінія В-лімфобластоїдних клітин, отримана від пацієнта з лейкемією. Цю клітинну лінію зазвичай використовують для дослідження імуноглобулінових про...

€430.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія CESS - це лінія лімфобластоїдних клітин групи В, отримана від людини, хворої на лейкемію. Ця клітинна лінія широко використовується для вивчення вироблення імуноглобулінів, зокрема секреції IgG, через її сильну відповідь на стимуляцію цитокінами. Клітини CESS трансформовані ВЕБ і мають поверхневі маркери, характерні для зрілих В-клітин, такі як CD19 і CD38. Вони експресують імуноглобуліни класу sIgG1 і слугують моделлю для вивчення диференціації та функції В-клітин, включаючи імунні відповіді, що регулюються цитокінами, такими як інтерлейкін-6 (IL-6), також відомий як фактор стимуляції В-клітин 2 (BSF-2). IL-6 відіграє вирішальну роль у стимуляції вироблення імуноглобулінів у клітинах CESS, що робить їх цінною моделлю для вивчення реакцій В-клітин в імунологічних дослідженнях.

Крім того, клітини CESS відіграють важливу роль у дослідженнях клітинної сигналізації та апоптозу. Зокрема, було показано, що ці клітини виробляють і реагують на фактор росту нервів (NGF) через аутокринний сигнальний механізм, експресуючи як високо-, так і низькоафінні рецептори NGF. Блокування сигналізації NGF антитілами або специфічними інгібіторами індукує апоптоз у клітинах CESS, що характеризується фосфорилюванням Bcl-2 та активацією шляху p38 MAPK. Це робить клітини CESS важливою моделлю для розуміння молекулярних механізмів виживання та апоптозу В-клітин, особливо в контексті сигналізації NGF та його регуляції білками сімейства Bcl-2.

Тканина
Периферична кров
Хвороба
Гострий мієлоїдний лейкоз
Застосування
Створення клітинних ліній Т-гібридом людини
Синоніми
  • Cess

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Підвіска
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Лімфобласт

04Ідентифікатори

Посилання
CESS (номер за каталогом Cytion 300262)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0209

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
Трансформовані EBV
Продукція
IL-2 після індукції TRF (Т-клітинно-заміщуючий фактор)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Рекомендується 1 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Дайте клітинам відновитися після процесу заморожування протягом щонайменше 48 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Етнічна приналежність
Європейський