Przejdź do treści
Ogniwa CESS
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Ostra białaczka szpikowa
Synonimy
Cess

Dokumenty

Ogniwa CESS

Cell line · Numer produktu 300262

Linia komórkowa CESS to linia limfoblastów typu B pochodząca od pacjenta cierpiącego na białaczkę. Linia ta jest powszechnie wykorzystywana do badań nad proteinami immunoglobulinowymi...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa CESS to limfoblastoidalna linia komórkowa B pochodząca od ludzkiego pacjenta z białaczką. Ta linia komórkowa jest powszechnie stosowana do badania produkcji immunoglobulin, w szczególności wydzielania IgG, ze względu na jej silną odpowiedź na stymulację cytokinami. Komórki CESS są transformowane wirusem EBV i wykazują markery powierzchniowe charakterystyczne dla dojrzałych komórek B, takie jak CD19 i CD38. Wyrażają one klasę immunoglobulin sIgG1 i służą jako model do badania różnicowania i funkcji komórek B, w tym odpowiedzi immunologicznych regulowanych przez cytokiny, takie jak interleukina-6 (IL-6), znana również jako czynnik stymulacji komórek B 2 (BSF-2). IL-6 odgrywa kluczową rolę w stymulowaniu produkcji immunoglobulin w komórkach CESS, co czyni je cennym modelem do badania odpowiedzi komórek B w badaniach immunologicznych.

Dodatkowo, komórki CESS odegrały kluczową rolę w badaniach skupiających się na sygnalizacji komórkowej i apoptozie. W szczególności wykazano, że komórki te wytwarzają i reagują na czynnik wzrostu nerwów (NGF) poprzez autokrynny mechanizm sygnalizacyjny, wyrażając zarówno receptory NGF o wysokim, jak i niskim powinowactwie. Blokowanie sygnalizacji NGF za pomocą przeciwciał lub specyficznych inhibitorów indukuje apoptozę w komórkach CESS, charakteryzującą się fosforylacją Bcl-2 i aktywacją szlaku p38 MAPK. Sprawia to, że komórki CESS są ważnym modelem dla zrozumienia molekularnych mechanizmów przeżycia i apoptozy komórek B, szczególnie w kontekście sygnalizacji NGF i jej regulacji białek z rodziny Bcl-2.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Ostra białaczka szpikowa
Zastosowania
Ustanowienie ludzkich linii komórkowych hybrydoma T
Synonimy
  • Cess

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Limfoblast

04Identyfikatory

Źródło
CESS (numer katalogowy Cytion 300262)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0209

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Przekształcone przez EBV
Produkty
IL-2 po indukcji TRF (czynnik zastępujący komórki T)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
Zaleca się 1 x 104 komórek/cm2.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Pozostawić komórki do regeneracji po procesie zamrażania przez co najmniej 48 godzin.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Pochodzenie etniczne
Europejski