HaCaT

HaCaT ląstelės yra pagrindinis dermatologinių tyrimų modelis, leidžiantis suprasti sudėtingus odos biologijos ir patologijos mechanizmus. Spontaniškai imortalizuota HaCaT ląstelių linija yra kilusi iš suaugusio žmogaus epidermio ląstelių ir išlaiko gebėjimą daugintis ir diferencijuotis, panašiai kaip baziniai keratinocitai in vivo. HaCaT ląstelės yra patikima platforma epidermio diferenciacijos procesui tirti ir epidermio diferenciacijos žymenims, būtiniems odos vientisumui palaikyti, tirti.

HaCaT ląstelių jautrumas apoptozei ir jų jautrumas apoptozę sukeliančioms medžiagoms yra išsamiai ištirtas, ypač naudojant citotoksines medžiagas, tokias kaip RIPL. Mokslininkai vertina šių medžiagų citotoksiškumą ir citotoksiškumo mastą naudodami HaCaT ląsteles, o ląstelių pokyčiams vizualizuoti naudoja tokius metodus kaip fluorescencinė mikroskopija.

Tyrėjai HaCaT ląsteles panaudojo įvairių medžiagų, įskaitant antimikrobinius substratus, poveikiui ir jų įtakai ląstelių gyvybingumui tirti. Šios ląstelės yra puikus substratas antimikrobinėms biomedžiagoms ir antimikrobiniams atelokolageno substratams, itin svarbiems odos atstatymui ir medicininėms reikmėms, išbandyti.

HaCaT epidermio linija taip pat labai svarbi tiriant ląstelių senėjimą, citokinus ir genų raiškos profilius, susijusius su senėjimu ir lėtinėmis ligomis. HaCaT ląstelių transkripcijos profiliai, įskaitant κB ir mikroRNA vaidmenį, leidžia suprasti molekulinio lygmens reguliavimo mechanizmus.

HaCaT keratinocitų linija, pasižyminti epidermio keratinocitų savybėmis, yra tinkama sistema sudėtingai epidermio ląstelių ir imuninės sistemos sąveikai tirti, ypač keratinocitų vaidmeniui ligų atvejais. Jie leidžia ištirti epigenetines modifikacijas ir jų įtaką keratinocitų diferenciacijai, įskaitant raginio apvalkalo, kuris yra pagrindinė odos barjerinės funkcijos ypatybė, formavimąsi.

Apibendrinant galima teigti, kad HaCaT ląstelės yra nepakeičiamas dermatologinių tyrimų modelis, padedantis geriau suprasti odos biologiją ir patologiją, nes yra panašios į bazinius keratinocitus ir geba augti bei diferencijuotis. Jų pritaikymas apima tiek epidermio diferenciacijos ir antimikrobinio poveikio tyrimus, tiek ląstelių reakcijų, pavyzdžiui, apoptozės, tyrimus, todėl jie yra kertinis ląstelių biologijos ir biomedicininių tyrimų akmuo.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Išmeskite seną terpę: Iš kolbų atsargiai išimkite seną terpę.
2. Išplaukite ląsteles: Į T25 kolbas įpilkite 3-5 ml fosfatu buferizuoto fiziologinio tirpalo (PBS) be kalcio ir magnio, o į T75 kolbas - 5-10 ml, kad išplautumėte prilipusias ląsteles.
3. Įpilkite EDTA tirpalo: Ląstelių sluoksnį visiškai uždenkite šviežiai paruoštu 0,05 % EDTA tirpalu. Naudokite 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms.
4. Inkubuoti: 10 minučių inkubuokite kolbas 37 °C temperatūroje.
5. Įpilkite tripsino/EDTA arba "TrypLE Express" tirpalo: Po inkubacijos į kolbas įpilkite šviežiai paruošto tripsino/EDTA tirpalo (0,05 % tripsino, 0,025 % EDTA) arba "TrypLE Express" tirpalo, kad ląstelių sluoksnis būtų visiškai padengtas. T25 kolboms naudokite 1 ml, o T75 kolboms - 2,5 ml. (Pastaba. 3 ir 4 žingsnių galima neatlikti, jei naudojate "TrypLE Express".)
6. Stebėkite atsiskyrimą: Stebėkite ląsteles mikroskopu. Ląstelės turėtų atsiskirti per 1-5 minutes.
7. Neutralizuokite tripsiną: Kai tik ląstelės atsiskiria, įpilkite ląstelių kultūros terpės, kurioje yra fetalinio galvijų serumo (FBS), kad neutralizuotumėte tripsino aktyvumą.
8. Perkelkite ląsteles: Ląstelių suspensiją išpilstykite į naujas kolbas, iš anksto pripildytas šviežios terpės.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime