HaCaT

HaCaT細胞は皮膚科学研究において極めて重要なモデルであり、皮膚生物学と病理学の複雑なメカニズムに関する洞察を提供している。自発的に不死化されたHaCaT細胞株は、成人のヒト表皮細胞に由来し、生体内の基底ケラチノサイトと同様に、増殖能と分化能を保持している。HaCaT細胞は、表皮の分化プロセスを研究し、皮膚の完全性を維持するために不可欠な表皮分化マーカーを研究するための強固なプラットフォームとして機能する。

HaCaT細胞のアポトーシス感受性とアポトーシス誘導剤に対する感受性は、特にRIPLのような細胞毒性薬剤との関連において、広く研究されている。研究者らはHaCaT細胞を用いてこれらの薬剤の細胞毒性および細胞毒性の程度を評価し、蛍光顕微鏡法などの技術を用いて細胞の変化を可視化している。

研究者たちはHaCaT細胞を利用して、抗菌基質を含む様々な薬剤の効果や、それらが細胞の生存率に及ぼす影響を調べてきた。これらの細胞は、抗菌性バイオマテリアルや抗菌性アテロコラーゲン基質を試験するための優れた基質であり、皮膚の修復や医療用途に極めて重要である。

HaCaT表皮細胞株はまた、細胞の老化、サイトカイン、老化や慢性疾患に関連する遺伝子発現プロファイルの研究においても重要な役割を果たしている。κBやマイクロRNAの役割を含むHaCaT細胞の転写プロファイルは、分子レベルでの制御メカニズムについての洞察を提供する。

表皮ケラチノサイトとしての特徴を持つHaCaTケラチノサイト株は、表皮細胞と免疫系の複雑な相互作用、特に疾患状態におけるケラチノサイトの役割を解明するための扱いやすい系を提供する。HaCaT細胞は、エピジェネティックな修飾と、皮膚のバリア機能における重要な特徴である角化エンベロープの形成を含むケラチノサイトの分化に対するその影響を調べることができる。

要約すると、HaCaT細胞は皮膚科学研究において欠くことのできないモデルであり、基底ケラチノサイトに類似し、細胞の増殖と分化が可能であることから、皮膚の生物学と病理学の深い理解を促している。その応用範囲は、表皮の分化や抗菌作用の研究からアポトーシスなどの細胞応答の研究まで幅広く、細胞生物学や生物医学研究の礎となっている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. 古い培地を捨てる：フラスコから古い培地を注意深く取り除く。
2. 細胞を洗浄する：カルシウムとマグネシウムを除いたリン酸緩衝生理食塩水（PBS）をT25フラスコには3～5ml、T75フラスコには5～10ml加え、接着細胞をすすぐ。
3. EDTA溶液を加える：新しく調製した0.05％EDTA溶液で細胞層全体を覆う。T25フラスコには1-2 ml、T75フラスコには2.5 mlを使用する。
4. インキュベート：フラスコを37℃で10分間インキュベートする。
5. Trypsin/EDTAまたはTrypLE Express溶液を加える：インキュベーション後、新たに調製したトリプシン／EDTA溶液（0.05％トリプシン、0.025％EDTA）またはTrypLE Expressを、細胞層が完全に覆われるようにフラスコに添加する。T25フラスコには1ml、T75フラスコには2.5mlを使用する。(注：TrypLE Expressを使用する場合、ステップ3と4は省略できます。）
6. 剥離を観察する：顕微鏡で細胞を観察する。細胞は1～5分以内に剥離するはずです。
7. トリプシンを中和する：細胞が剥離したらすぐに、ウシ胎児血清（FBS）を含む細胞培養培地を加え、トリプシン活性を中和する。
8. 細胞を移す：細胞懸濁液を、新鮮な培養メデュームをあらかじめ入れた新しいフラスコに分注する。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。