HaCaT

Celice HaCaT so ključni model v dermatoloških raziskavah, saj omogočajo vpogled v zapletene mehanizme biologije in patologije kože. Spontano imortalizirana celična linija HaCaT izhaja iz odraslih človeških epidermalnih celic in ohranja sposobnost razmnoževanja in diferenciacije, podobno kot bazalni keratinociti in vivo. Celice HaCaT služijo kot zanesljiva platforma za raziskovanje procesa diferenciacije epidermisa in preučevanje markerjev epidermalne diferenciacije, ki so bistveni za ohranjanje celovitosti kože.

Občutljivost celic HaCaT za apoptozo in njihova občutljivost na dejavnike, ki povzročajo apoptozo, sta obsežno raziskani, zlasti v okviru citotoksičnih dejavnikov, kot je RIPL. Raziskovalci ocenjujejo citotoksičnost teh snovi in obseg citotoksičnosti na celicah HaCaT, pri čemer za vizualizacijo celičnih sprememb uporabljajo tehnike, kot je fluorescenčna mikroskopija.

Raziskovalci so uporabili celice HaCaT za preučevanje učinkov različnih snovi, vključno s protimikrobnimi substrati, in njihovega vpliva na vitalnost celic. Te celice so odličen substrat za testiranje protimikrobnih biomaterialov in protimikrobnih substratov atelokolagena, ki so ključnega pomena za obnovo kože in medicinske aplikacije.

Epidermalna linija HaCaT ima ključno vlogo tudi pri preučevanju celične senescence, citokinov in profilov izražanja genov, povezanih s staranjem in kroničnimi boleznimi. Transkripcijski profili celic HaCaT, vključno z vlogo κB in mikroRNA, omogočajo vpogled v regulativne mehanizme na molekularni ravni.

Linija keratinocitov HaCaT s svojimi lastnostmi epidermalnih keratinocitov ponuja uporaben sistem za raziskovanje zapletenega medsebojnega delovanja epidermalnih celic in imunskega sistema, zlasti vloge keratinocitov v bolezenskih stanjih. Omogočajo raziskovanje epigenetskih sprememb in njihovega vpliva na diferenciacijo keratinocitov, vključno z oblikovanjem roženaste ovojnice, ki je ključna značilnost za pregradno funkcijo kože.

Če povzamemo, so celice HaCaT nepogrešljiv model v dermatoloških raziskavah, saj s svojo podobnostjo bazalnim keratinocitom in sposobnostjo rasti in diferenciacije omogočajo globlje razumevanje biologije in patologije kože. Njihova uporaba sega od preučevanja diferenciacije epidermisa in protimikrobnih učinkov do raziskovanja celičnih odzivov, kot je apoptoza, zato so temelj celične biologije in biomedicinskih raziskav.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Zavrzite star medij: Iz bučk previdno odstranite staro gojišče.
2. Izperite celice: V erlenmajerice T25 dodajte 3-5 ml s fosfatom puferirane fiziološke raztopine (PBS) brez kalcija in magnezija, v erlenmajerice T75 pa 5-10 ml, da sperete prilepljene celice.
3. Dodajte raztopino EDTA: Celično plast v celoti prekrijte s sveže pripravljeno 0,05-odstotno raztopino EDTA. Uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75.
4. Inkubirajte: Bučke inkubirajte pri 37 °C 10 minut.
5. Dodajte tripsin/EDTA ali raztopino TrypLE Express: Po inkubaciji v bučke dodajte sveže pripravljeno raztopino tripsina/EDTA (0,05 % tripsin, 0,025 % EDTA) ali raztopino TrypLE Express, tako da je plast celic popolnoma prekrita. Uporabite 1 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. (Opomba: Če uporabljate TrypLE Express, lahko izpustite 3. in 4. korak.)
6. Spremljajte ločevanje: Celice opazujte pod mikroskopom. Celice se morajo odcepiti v 1-5 minutah.
7. Nevtralizirajte tripsin: Takoj ko se celice odcepijo, dodajte gojišče za celične kulture, ki vsebuje fetalni goveji serum (FBS), da nevtralizirate aktivnost tripsina.
8. Prenesite celice: Celično suspenzijo prelijte v nove erlenmajerice, predhodno napolnjene s svežim gojiščem.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo