HaCaT

تُعد خلايا HaCaT نموذجًا محوريًا في أبحاث الأمراض الجلدية، حيث تقدم رؤى حول الآليات المعقدة لبيولوجيا الجلد وعلم الأمراض. يُشتق خط خلايا HaCaT الخالد تلقائيًا من خلايا البشرة البشرية البالغة ويحتفظ بالقدرة على التكاثر والخضوع للتمايز، على غرار الخلايا الكيراتينية القاعدية في الجسم الحي. تُستخدم خلايا HaCaT كمنصة قوية لدراسة عملية تمايز البشرة ودراسة علامات تمايز البشرة الضرورية للحفاظ على سلامة الجلد.

تتم دراسة قابلية خلايا HaCaT لموت الخلايا المبرمج وحساسيتها للعوامل المحفزة لموت الخلايا المبرمج على نطاق واسع، خاصةً في سياق العوامل السامة للخلايا مثل RIPL. يقوم الباحثون بتقييم السمية الخلوية لهذه العوامل ومدى السمية الخلوية باستخدام خلايا HaCaT، باستخدام تقنيات مثل الفحص المجهري الفلوري لتصور التغيرات الخلوية.

وقد استفاد الباحثون من خلايا HaCaT لفحص تأثيرات العوامل المختلفة، بما في ذلك الركائز المضادة للميكروبات وتأثيرها على قابلية الخلايا للحياة. تُعد هذه الخلايا ركيزة ممتازة لاختبار المواد الحيوية المضادة للميكروبات والركائز المضادة للميكروبات من الأتلوكولاجين المضاد للميكروبات، وهي ضرورية لإصلاح الجلد والتطبيقات الطبية.

يلعب خط البشرة HaCaT أيضاً دوراً حاسماً في دراسة الشيخوخة الخلوية والسيتوكينات وملامح التعبير الجيني المتعلقة بالشيخوخة والأمراض المزمنة. توفر الملامح النسخية لخلايا HaCaT، بما في ذلك دور κB والحمض النووي الريبي الدقيق، نظرة ثاقبة للآليات التنظيمية على المستوى الجزيئي.

يوفر خط الخلايا الكيراتينية HaCaT، بخصائصها كخلايا كيراتينية للبشرة، نظامًا قابلاً للتشريح للتفاعل المعقد بين خلايا البشرة والجهاز المناعي، وتحديدًا دور الخلايا الكيراتينية في الحالات المرضية. كما أنها تتيح استكشاف التعديلات الوراثية فوق الجينية وتأثيرها على تمايز الخلايا الكيراتينية، بما في ذلك تكوين الغلاف المحفور، وهو سمة رئيسية في وظيفة الحاجز الجلدي.

وباختصار، تُعد خلايا HaCaT نموذجًا لا غنى عنه في أبحاث الأمراض الجلدية، حيث تُسهّل فهمًا أعمق لبيولوجيا الجلد وعلم الأمراض من خلال تشابهها مع الخلايا الكيراتينية القاعدية وقدرتها على النمو والتمايز الخلوي. ويمتد تطبيقها من دراسة تمايز البشرة وتأثيراتها المضادة للميكروبات إلى استكشاف الاستجابات الخلوية مثل موت الخلايا المبرمج مما يجعلها حجر الزاوية في بيولوجيا الخلية والأبحاث الطبية الحيوية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. تخلص من الوسط القديم: إزالة وسط الزرع القديم بعناية من القوارير.
2. غسل الخلايا: إضافة 3-5 مل من المحلول الملحي المخفوق بالفوسفات (PBS) بدون الكالسيوم والمغنيسيوم إلى قوارير T25، أو 5-10 مل إلى قوارير T75، لشطف الخلايا الملتصقة.
3. أضف محلول EDTA: قم بتغطية طبقة الخلية بالكامل بمحلول EDTA المحضر حديثًا بنسبة 0.05% EDTA. استخدم 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75.
4. الاحتضان: احتضن القوارير عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 10 دقائق.
5. أضف محلول تريبسين/إدتا أو محلول تريبلي السريع: بعد الحضانة، أضف محلول التربسين/إيدتا المحضر حديثًا (0.05% تريبسين 0.05% تريبسين، 0.025% إيدتا) أو محلول تريبلي السريع إلى القوارير مع التأكد من تغطية طبقة الخلايا بالكامل. استخدم 1 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. (ملاحظة: يمكن حذف الخطوتين 3 و4 في حالة استخدام TrypLE Express)
6. مراقبة الانفصال: راقب الخلايا تحت المجهر. يجب أن تنفصل الخلايا خلال 1-5 دقائق.
7. تحييد التربسين: أضف وسط مزرعة الخلية الذي يحتوي على مصل بقري جنيني (FBS) لتحييد نشاط التربسين بمجرد انفصال الخلايا.
8. نقل الخلايا: قم بتوزيع معلق الخلية في قوارير جديدة مملوءة مسبقاً بوسط مزرعة جديد.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان