HaCaT

Bunky HaCaT sú kľúčovým modelom v dermatologickom výskume, ktorý ponúka pohľad na komplexné mechanizmy biológie a patológie kože. Spontánne imortalizovaná línia buniek HaCaT je odvodená z dospelých ľudských epidermálnych buniek a zachováva si schopnosť proliferácie a diferenciácie podobne ako bazálne keratinocyty in vivo. Bunky HaCaT slúžia ako spoľahlivá platforma na skúmanie procesu epidermálnej diferenciácie a štúdium markerov epidermálnej diferenciácie nevyhnutných na zachovanie integrity kože.

Náchylnosť buniek HaCaT na apoptózu a ich citlivosť na látky indukujúce apoptózu sa podrobne študuje, najmä v súvislosti s cytotoxickými látkami, ako je RIPL. Výskumníci hodnotia cytotoxicitu týchto látok a rozsah cytotoxicity pomocou buniek HaCaT, pričom na vizualizáciu bunkových zmien využívajú techniky, ako je fluorescenčná mikroskopia.

Výskumníci využili bunky HaCaT na skúmanie účinkov rôznych látok vrátane antimikrobiálnych substrátov a ich vplyvu na životaschopnosť buniek. Tieto bunky sú vynikajúcim substrátom na testovanie antimikrobiálnych biomateriálov a antimikrobiálnych atelokolagénových substrátov, ktoré sú kľúčové pre obnovu kože a lekárske aplikácie.

Epidermálna línia HaCaT zohráva kľúčovú úlohu aj pri štúdiu bunkovej senescencie, cytokínov a profilov génovej expresie súvisiacich so starnutím a chronickými chorobami. Transkripčné profily buniek HaCaT vrátane úlohy κB a mikroRNA poskytujú pohľad na regulačné mechanizmy na molekulárnej úrovni.

Línia keratinocytov HaCaT so svojimi vlastnosťami epidermálnych keratinocytov ponúka sledovateľný systém na rozbor zložitej interakcie medzi epidermálnymi bunkami a imunitným systémom, konkrétne úlohy keratinocytov v chorobných stavoch. Umožňujú skúmať epigenetické modifikácie a ich vplyv na diferenciáciu keratinocytov vrátane tvorby rohovinového obalu, ktorý je kľúčovým prvkom bariérovej funkcie kože.

Celkovo možno povedať, že bunky HaCaT sú nenahraditeľným modelom v dermatologickom výskume, ktorý umožňuje hlbšie pochopenie biológie a patológie kože vďaka ich podobnosti s bazálnymi keratinocytmi a ich schopnosti podstupovať rast a diferenciáciu buniek. Ich využitie siaha od štúdia epidermálnej diferenciácie a antimikrobiálnych účinkov až po skúmanie bunkových reakcií, ako je apoptóza, čím sa stali základom bunkovej biológie a biomedicínskeho výskumu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Vyradenie starého média: Staré kultivačné médium opatrne odstráňte z banky.
2. Premyte bunky: Pridajte 3 - 5 ml fosfátom pufrovaného fyziologického roztoku (PBS) bez vápnika a horčíka do banky T25 alebo 5 - 10 ml do banky T75, aby ste opláchli priľnuté bunky.
3. Pridajte roztok EDTA: Vrstvu buniek úplne pokryte čerstvo pripraveným 0,05 % roztokom EDTA. Použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75.
4. Inkubujte: Inkubujte banky pri teplote 37 °C počas 10 minút.
5. Pridajte roztok Trypsin/EDTA alebo TrypLE Express: Po inkubácii pridajte do banky čerstvo pripravený roztok trypsínu/EDTA (0,05 % trypsín, 0,025 % EDTA) alebo TrypLE Express, pričom zabezpečte, aby bola vrstva buniek úplne pokrytá. Použite 1 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. (Poznámka: Ak používate TrypLE Express, kroky 3 a 4 môžete vynechať.)
6. Monitorujte oddeľovanie: Pozorujte bunky pod mikroskopom. Bunky by sa mali oddeliť do 1-5 minút.
7. Neutralizujte trypsín: Pridajte médium bunkovej kultúry obsahujúce fetálne hovädzie sérum (FBS), aby ste neutralizovali aktivitu trypsínu hneď po oddelení buniek.
8. Preneste bunky: Bunková suspenzia sa preleje do nových fliaš vopred naplnených čerstvým kultivačným médiom.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke