Przejdź do treści
AMO-1
Chusteczka
Wodobrzusze
Choroba
Szpiczak mnogi
Synonimy
AMo1, AMO1

Dokumenty

AMO-1

Cell line · Numer produktu 305525

Linia komórkowa AMO-1 stanowi model szpiczaka mnogiego wywodzący się ze złośliwego nowotworu komórek plazmatycznych. Jest ona szeroko stosowana w badaniach nad mechanizmami…

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa AMO-1 stanowi model szpiczaka mnogiego wywodzący się ze złośliwego nowotworu komórek plazmatycznych. Jest ona szeroko stosowana w badaniach nad mechanizmami wrażliwości na leki, apoptozą oraz sygnalizacją komórkową w szpiczaku. Komórki AMO-1 są wrażliwe na różne środki chemioterapeutyczne oraz terapie celowane, takie jak inhibitory proteasomu i inhibitory kinazy tyrozynowej, które odgrywają kluczową rolę w leczeniu szpiczaka mnogiego. Badania wykazały, że leczenie inhibitorami kinazy tyrozynowej śledziony (Syk) wywołuje znaczące działanie antyproliferacyjne i proapoptotyczne w komórkach AMO-1. Działanie to polega na hamowaniu kluczowych szlaków sygnałowych, w tym MAPK i NF-kappaB, i charakteryzuje się zwiększonym uwalnianiem cytochromu c oraz aktywacją markerów apoptozy, takich jak kaspaza-3 i PARP-1. Ponadto hamowanie Syk ogranicza migrację komórek i ich interakcję ze składnikami zrębu szpiku kostnego, co dodatkowo ogranicza przeżywalność komórek szpiczaka.

Komórki AMO-1 wykazały również wrażliwość na związki naturalne działające na oś Notch3-p53, takie jak pochodne sofokarpiny. Związki te zmniejszają żywotność komórek poprzez obniżanie ekspresji białek antyapoptotycznych (np. Bcl-2) oraz zwiększanie ekspresji czynników proapoptotycznych (np. Bax i rozszczepionej kaspazy-3). Ponadto leczenie sofokarpiną zmniejsza ekspresję Notch3 – szlaku związanego z progresją nowotworu w szpiczaku i innych nowotworach. To sprawia, że komórki AMO-1 stanowią skuteczny model do testowania leków mających na celu modyfikację sygnalizacji Notch oraz szlaków apoptotycznych, w których pośredniczy p53. W kontekście immunoterapii komórki AMO-1 są rozpoznawane przez komórki T γδ poprzez ekspresję cząsteczki adhezyjnej międzykomórkowej 1 (ICAM-1), a transfekcja mająca na celu zwiększenie ekspresji ICAM-1 zwiększa ich podatność na lizę za pośrednictwem komórek T. Ta cecha stanowi podstawę badań nad immunoterapiami ukierunkowanymi na szpiczaka jako alternatywnym podejściem do leczenia przypadków opornych na leczenie.

Chusteczka
Wodobrzusze
Choroba
Szpiczak mnogi
Synonimy
  • AMo1
  • AMO1

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Okrągłe komórki

04Identyfikatory

Źródło
AMO-1 (numer katalogowy Cytion 305525)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1806

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Fuzja genów: IGKV1-8-IGKJ1; Fuzja genów: IGKV3-20-IGKJ2; Mutacja: BCOR, p.Gln312del (c.932_934AGC[1]) (c.935_937delAGC), heterozygotyczna; Mutacja: KRAS, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterozygotyczna; Mutacja: STAT3, p.Cys712Tyr (c.2135G>A), heterozygotyczna; Mutacja: TET2, p.Gln1699Ter (c.5095C>T), heterozygotyczna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 20% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
3–5 × 10⁵/ml
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
64 lata
Pochodzenie etniczne
Japoński

10Szczegóły produktu

Tabela składu