Pāriet uz saturu
AMO-1
Audums
Ascīts
Slimība
Multiplā mieloma
Sinonīmi
AMo1, AMO1

Dokumenti

AMO-1

Cell line · Preces numurs 305525

AMO-1 šūnu līnija ir daudzkārtējās mielomas modelis, kas iegūts no ļaundabīga plazmas šūnu audzēja. To plaši izmanto pētījumos, kuros izpēta ... mehānismus

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

AMO-1 šūnu līnija ir daudzkārtējās mielomas modelis, kas iegūts no ļaundabīga plazmas šūnu audzēja. To plaši izmanto pētījumos, kuros izpēta zāļu jutības mehānismus, apoptozi un audzēja šūnu signālu pārraidi mielomā. AMO-1 šūnas ir jutīgas pret dažādiem ķīmijterapijas līdzekļiem un mērķtiecīgām ārstēšanas metodēm, piemēram, proteasomu inhibitoriem un tirozīna kināzes inhibitoriem, kuriem ir kļuvusi izšķiroša nozīme daudzkārtējās mielomas terapijā. Pētījumi ir pierādījuši, ka ārstēšana ar liesas tirozīna kināzes (Syk) inhibitoriem izraisa ievērojamu antiproliferatīvu un proapoptotisku iedarbību AMO-1 šūnās. Šī iedarbība notiek, inhibējot kritiskos signālu pārraides ceļus, tostarp MAPK un NF-kappaB, un to raksturo palielināta citohroma c atbrīvošanās un tādu apoptozes marķieru kā kaspāze-3 un PARP-1 aktivācija. Turklāt Syk inhibīcija samazina šūnu migrāciju un mijiedarbību ar kaulu smadzeņu stromas komponentiem, tādējādi vēl vairāk ierobežojot mielomas šūnu izdzīvošanu.

AMO-1 šūnas ir parādījušas jutību arī pret dabīgiem savienojumiem, kas iedarbojas uz Notch3-p53 asi, piemēram, sofokarpīna atvasinājumiem. Šie savienojumi samazina šūnu dzīvotspēju, samazinot anti-apoptozes proteīnu (piem., Bcl-2) ekspresiju un palielinot pro-apoptozes faktoru (piem., Bax un sašķeltā kazeāzes-3) ekspresiju. Turklāt ārstēšana ar sofokarpīnu samazina Notch3 ekspresiju — signālceļu, kas saistīts ar audzēja progresēšanu mielomā un citos vēža veidos. Tas padara AMO-1 par efektīvu modeli zāļu testēšanai, kuru mērķis ir modificēt Notch signālceļu un p53 mediētos apoptozes ceļus. Imunoterapijas kontekstā AMO-1 šūnas atpazīst γδ T šūnas, pateicoties starpšūnu adhezijas molekulas-1 (ICAM-1) ekspresijai, un transfekcija, kas palielina ICAM-1 ekspresiju, pastiprina to uzņēmību pret T šūnu mediētu līzi. Šī īpašība veicina pētījumus par imūnterapijām, kas vērstas pret mielomu, kā alternatīvu pieeju ārstēšanai rezistentiem gadījumiem.

Audums
Ascīts
Slimība
Multiplā mieloma
Sinonīmi
  • AMo1
  • AMO1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas

04Identifikatori

Atsauce
AMO-1 (Cytion kataloga numurs 305525)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1806

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Gēnu fūzija: IGKV1-8-IGKJ1; Gēnu fūzija: IGKV3-20-IGKJ2; Mutācija: BCOR, p.Gln312del (c.932_934AGC[1]) (c.935_937delAGC), heterozigota; Mutācija: KRAS, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterozigota; Mutācija: STAT3, p.Cys712Tyr (c.2135G>A), heterozigota; Mutācija: TET2, p.Gln1699Ter (c.5095C>T), heterozigota

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 20% FBS
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Sēšanas blīvums
3–5 × 10⁵/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
64 gadi
Etniskā piederība
Japāņu

10Informācija par produktu

Sastāva tabula