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AMO-1
Tessuto
Ascite
Malattia
Mieloma multiplo
Sinonimi
AMo1, AMO1

Documenti

AMO-1

Cell line · Codice prodotto 305525

La linea cellulare AMO-1 è un modello di mieloma multiplo derivato da una neoplasia maligna delle plasmacellule. È ampiamente utilizzata nella ricerca volta a studiare i meccanismi di ...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare AMO-1 è un modello di mieloma multiplo derivato da una neoplasia maligna delle plasmacellule. È ampiamente utilizzata nella ricerca volta a studiare i meccanismi di sensibilità ai farmaci, l’apoptosi e la segnalazione delle cellule tumorali nel mieloma. Le cellule AMO-1 sono sensibili a vari agenti chemioterapici e a trattamenti mirati, quali gli inibitori del proteasoma e gli inibitori della tirosin-chinasi, che sono diventati fondamentali nella terapia del mieloma multiplo. Gli studi hanno dimostrato che il trattamento con inibitori della tirosina chinasi della milza (Syk) induce significativi effetti antiproliferativi e pro-apoptotici nelle cellule AMO-1. Tale azione avviene attraverso l’inibizione di vie di segnalazione critiche, tra cui MAPK e NF-kappaB, ed è caratterizzata da un aumento del rilascio di citocromo c e dall’attivazione di marcatori apoptotici quali la caspasi-3 e la PARP-1. Inoltre, l’inibizione di Syk riduce la migrazione cellulare e l’interazione con i componenti stromali del midollo osseo, limitando ulteriormente la sopravvivenza delle cellule mielomatose.

Le cellule AMO-1 hanno inoltre dimostrato sensibilità ai composti naturali che agiscono sull’asse Notch3-p53, come i derivati della sofocarpina. Questi composti riducono la vitalità cellulare attraverso la downregolazione delle proteine antiapoptotiche (ad es. Bcl-2) e la sovraregolazione dei fattori proapoptotici (ad es. Bax e la caspasi-3 clivata). Inoltre, il trattamento con sofocarpina riduce l’espressione di Notch3, una via segnaletica collegata alla progressione tumorale nel mieloma e in altri tumori. Ciò rende le cellule AMO-1 un modello efficace per testare farmaci mirati a modificare la segnalazione di Notch e le vie apoptotiche mediate da p53. Nel contesto dell’immunoterapia, le cellule AMO-1 vengono riconosciute dai linfociti T γδ attraverso l’espressione della molecola di adesione intercellulare-1 (ICAM-1), e la trasfezione volta ad aumentare l’espressione di ICAM-1 ne potenzia la suscettibilità alla lisi mediata dai linfociti T. Questa caratteristica supporta gli studi sulle immunoterapie mirate al mieloma come approccio alternativo ai casi resistenti al trattamento.

Tessuto
Ascite
Malattia
Mieloma multiplo
Sinonimi
  • AMo1
  • AMO1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde

04Identificatori

Riferimento bibliografico
AMO-1 (codice catalogo Cytion 305525)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1806

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Fusione genica: IGKV1-8-IGKJ1; Fusione genica: IGKV3-20-IGKJ2; Mutazione: BCOR, p.Gln312del (c.932_934AGC[1]) (c.935_937delAGC), eterozigote; Mutazione: KRAS, p.Ala146Thr (c.436G>A), eterozigote; Mutazione: STAT3, p.Cys712Tyr (c.2135G>A), eterozigote; Mutazione: TET2, p.Gln1699Ter (c.5095C>T), eterozigote

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 20% di FBS
Subcoltura
Raccogliere le cellule in sospensione in una provetta da 15 ml e lavare delicatamente le cellule aderenti con PBS privo di calcio e magnesio (utilizzare 3-5 ml per le fiasche T25 e 5-10 ml per le fiasche T75). Applicare Accutase (1-2 ml per le beute T25, 2,5 ml per le beute T75) assicurando la copertura completa dello strato cellulare. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 10 minuti. Dopo l'incubazione, unire e centrifugare sia la sospensione che le cellule aderenti. Dopo la centrifugazione, risospendere accuratamente il pellet cellulare e trasferire la sospensione cellulare in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
3-5*10^5/ml
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
64 anni
Etnia
Giapponese

10Dettagli sul prodotto

Tabella delle composizioni