Siirry sisältöön
AMO-1
Kudos
Askites
Sairaus
Multippeli myelooma
Synonyymit
AMo1, AMO1

Asiakirjat

AMO-1

Cell line · Tuotenumero 305525

AMO-1-solulinja on pahanlaatuisesta plasmasolukasvaimesta johdettu multippelin myelooman malli. Sitä käytetään laajasti tutkimuksessa, jossa selvitetään ...:n mekanismeja

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

AMO-1-solulinja on pahanlaatuisesta plasmasolukasvaimesta johdettu multippelin myelooman malli. Sitä käytetään laajasti tutkimuksessa, jossa selvitetään lääkeherkkyyden, apoptoosin ja kasvainsolujen signalointimekanismeja myeloomassa. AMO-1-solut ovat herkkiä erilaisille kemoterapeuttisille aineille ja kohdennetuille hoidoille, kuten proteasomin estäjille ja tyrosiinikinaasin estäjille, joista on tullut keskeisiä monimyelooman hoidossa. Tutkimukset ovat osoittaneet, että pernan tyrosiinikinaasi (Syk)-estäjillä annettu hoito aiheuttaa merkittäviä solujen lisääntymistä estäviä ja apoptoosia edistäviä vaikutuksia AMO-1-soluissa. Tämä vaikutus tapahtuu keskeisten signalointireittien, kuten MAPK:n ja NF-kappaB:n, estämisen kautta, ja sille on ominaista sytokromi c:n lisääntynyt vapautuminen sekä apoptoosimarkkerien, kuten kaspaasi-3:n ja PARP-1:n, aktivoituminen. Lisäksi Syk:n estäminen vähentää solujen migraatiota ja vuorovaikutusta luuytimen stromaalisten komponenttien kanssa, mikä rajoittaa entisestään myeloomasolujen selviytymistä.

AMO-1-solut ovat osoittaneet herkkyyttä myös Notch3-p53-akseliin kohdistuville luonnollisille yhdisteille, kuten sofokarpiinijohdannaisille. Nämä yhdisteet vähentävät solujen elinkelpoisuutta säätelemällä alaspäin apoptoosia estäviä proteiineja (esim. Bcl-2) ja säätelemällä ylöspäin apoptoosia edistäviä tekijöitä (esim. Bax ja pilkottu kaspaasi-3). Lisäksi sofokarpiinihoito vähentää Notch3:n ilmentymistä, joka on myelooman ja muiden syöpien etenemiseen liittyvä signalointireitti. Tämä tekee AMO-1-soluista tehokkaan mallin sellaisten lääkkeiden testaamiseen, joiden tarkoituksena on muokata Notch-signalointia ja p53:n välittämiä apoptoottisia reittejä. Immunoterapian yhteydessä γδ-T-solut tunnistavat AMO-1-solut solujen välisen adheesiomolekyylin 1 (ICAM-1) ilmentymisen kautta, ja transfektio ICAM-1:n ilmentymisen lisäämiseksi parantaa niiden alttiutta T-soluvälitteiselle hajoamiselle. Tämä ominaisuus tukee myeloomaan kohdistuvien immunoterapioiden tutkimusta vaihtoehtoisena lähestymistapana hoitoresistenteille tapauksille.

Kudos
Askites
Sairaus
Multippeli myelooma
Synonyymit
  • AMo1
  • AMO1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pyöreät kennot

04Tunnisteet

Lähdeviite
AMO-1 (Cytionin tuotenumero 305525)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1806

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Geenifuusio: IGKV1-8-IGKJ1; Geenifuusio: IGKV3-20-IGKJ2; Mutaatio: BCOR, p.Gln312del (c.932_934AGC[1]) (c.935_937delAGC), heterotsygoottinen; Mutaatio: KRAS, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterotsygoottinen; Mutaatio: STAT3, p.Cys712Tyr (c.2135G>A), heterotsygoottinen; Mutaatio: TET2, p.Gln1699Ter (c.5095C>T), heterotsygootti

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 20 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
3–5 × 10⁵/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
64 vuotta
Etnisyys
Japanilainen

10Tuotetiedot

Koostumustaulukko