Przejdź do treści
HT-1376
Chusteczka
Pęcherz moczowy
Choroba
Rak pęcherza moczowego
Synonimy
HT1376, HT 1376, HT 1376.T

Dokumenty

HT-1376

Cell line · Numer produktu 305100

The HT-1376 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a grade 3 transitional cell carcinoma. This cell line was established from a...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HT-1376 pochodzi z ludzkiego raka pęcherza moczowego, w szczególności raka przejściowokomórkowego 3. stopnia. Ta linia komórkowa została utworzona z guza uzyskanego w wyniku przezcewkowej resekcji u dorosłej pacjentki, u której w przeszłości występował inwazyjny rak pęcherza moczowego. Komórki HT-1376 wykazują cechy nabłonkowe, w tym obecność mikrokosmków i tonofibryli, które wskazują na ich nabłonkowe pochodzenie. Dodatkowo, komórki te wykazują kilka chromosomów markerowych, które odróżniają je od innych znanych linii komórek nowotworowych. Wiadomo również, że komórki HT-1376 rosną w miękkim agarze i są wysoce nowotworowe, tworząc guzy po wstrzyknięciu myszom i chomikom z obniżoną odpornością.

HT-1376 ma istotne znaczenie w badaniach nad rakiem pęcherza moczowego ze względu na swój profil genetyczny, w tym znaczące zmiany w regionie chromosomalnym 9p21. Region ten często ulega dużym homozygotycznym delecjom, co prowadzi do inaktywacji krytycznych genów supresorowych nowotworów, takich jak CDKN2, CDKN2B i MTAP. Delecje te są powszechne w raku pęcherza moczowego i mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia mechanizmów molekularnych leżących u podstaw nowotworzenia. Na przykład, utrata CDKN2 i CDKN2B jest związana z rozregulowaniem cyklu komórkowego, co jest kluczowym wydarzeniem w progresji raka. Co więcej, komórki HT-1376 były badane pod kątem ekspresji białka p16, produktu genu CDKN2, co jest często skorelowane z brakiem ekspresji białka pRb, innego białka supresorowego nowotworu.

Linia komórkowa HT-1376 była również wykorzystywana w badaniach wirusologicznych do oceny obecności wirusów nowotworowych, chociaż w komórkach tych nie wykryto ekspresji wirusów. Sprawia to, że HT-1376 jest cennym modelem do badania niewirusowych mechanizmów rozwoju i progresji raka pęcherza moczowego. Zmiany genetyczne linii komórkowej i jej zdolność do wzrostu in vitro i in vivo stanowią solidną platformę do badań przedklinicznych, w tym testowania leków i badania nowych strategii terapeutycznych ukierunkowanych na określone szlaki genetyczne w raku pęcherza moczowego.

Chusteczka
Pęcherz moczowy
Choroba
Rak pęcherza moczowego
Synonimy
  • HT1376
  • HT 1376
  • HT 1376.T

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Nowotworotwórczy
Tak
Czas podwojenia
31 godzin

04Identyfikatory

Źródło
HT-1376 (numer katalogowy Cytion 305100)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1292

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Aktywność fibrynolityczna, interferon

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
58 lat
Pochodzenie etniczne
Europejski