Preskoči na vsebino
HT-1376
Tkivo
Urinski mehur
Bolezen
Karcinom mehurja
Sinonimi
HT1376, HT 1376, HT 1376.T

Dokumenti

HT-1376

Cell line · Številka izdelka 305100

The HT-1376 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a grade 3 transitional cell carcinoma. This cell line was established from a...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HT-1376 izhaja iz človeškega karcinoma sečnega mehurja, natančneje prehodnoceličnega karcinoma stopnje 3. Ta celična linija je bila ustvarjena iz tumorja, pridobljenega s transuretralno resekcijo pri odrasli pacientki, ki je imela v preteklosti invazivni karcinom sečnega mehurja. Celice HT-1376 imajo epitelijske značilnosti, vključno s prisotnostjo mikrovilov in tonofibril, kar kaže na njihov epitelijski izvor. Poleg tega imajo te celice več označevalnih kromosomov, po katerih se razlikujejo od drugih znanih tumorskih celičnih linij. Znano je tudi, da celice HT-1376 rastejo v mehkem agarju in so zelo tumorogene ter tvorijo tumorje, ko jih vbrizgajo imunsko oslabljenim mišim in hrčkom.

HT-1376 je pomemben za raziskave raka mehurja zaradi svojega genetskega profila, vključno z opaznimi spremembami v kromosomski regiji 9p21. V tej regiji pogosto pride do velikih homozigotnih delecij, kar povzroči inaktivacijo ključnih tumorskih supresorskih genov, kot so CDKN2, CDKN2B in MTAP. Ti deleti so pogosti pri raku mehurja in so ključnega pomena za razumevanje molekularnih mehanizmov, na katerih temelji tumorigeneza. Izguba CDKN2 in CDKN2B je na primer povezana z motnjami v regulaciji celičnega cikla, kar je ključni dogodek pri napredovanju raka. Poleg tega so v celicah HT-1376 preučevali izražanje beljakovine p16, produkta gena CDKN2, ki je pogosto povezano z odsotnostjo izražanja pRb, druge tumorske supresorske beljakovine.

Celična linija HT-1376 je bila uporabljena tudi v viroloških raziskavah za ocenjevanje prisotnosti tumorskih virusov, čeprav v teh celicah ni bilo ugotovljeno izražanje virusov. Zato je HT-1376 dragocen model za preučevanje nevirusnih mehanizmov razvoja in napredovanja raka mehurja. Genetske spremembe celične linije in njena sposobnost rasti in vitro in in vivo zagotavljajo zanesljivo platformo za predklinične študije, vključno s testiranjem zdravil in raziskovanjem novih terapevtskih strategij, usmerjenih v specifične genetske poti pri raku mehurja.

Tkivo
Urinski mehur
Bolezen
Karcinom mehurja
Sinonimi
  • HT1376
  • HT 1376
  • HT 1376.T

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Tumorigeničen
Da
Čas podvojitve
31 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HT-1376 (kataloška številka Cytion 305100)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1292

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Fibrinolitična aktivnost, interferon

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
58 let
Etnična pripadnost
Evropski