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HT-1376
Tecido
Bexiga urinária
Doença
Carcinoma da bexiga
Sinónimos
HT1376, HT 1376, HT 1376.T

Documentos

HT-1376

Cell line · Número do produto 305100

The HT-1376 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a grade 3 transitional cell carcinoma. This cell line was established from a...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular HT-1376 é derivada de um carcinoma da bexiga humana, especificamente um carcinoma de células de transição de grau 3. Esta linha celular foi estabelecida a partir de um tumor obtido por ressecção transuretral de uma doente adulta do sexo feminino com antecedentes de carcinoma invasivo da bexiga. As células HT-1376 apresentam caraterísticas epiteliais, incluindo a presença de microvilosidades e tonofibrilas, que são indicativas da sua origem epitelial. Além disso, estas células apresentam vários cromossomas marcadores, que as distinguem de outras linhas celulares tumorais conhecidas. Sabe-se também que as células HT-1376 crescem em ágar mole e são altamente tumorigénicas, formando tumores quando injectadas em ratinhos e hamsters imunocomprometidos.

A HT-1376 é importante na investigação do cancro da bexiga devido ao seu perfil genético, incluindo alterações notáveis na região cromossómica 9p21. Esta região sofre frequentemente grandes deleções homozigóticas, levando à inativação de genes supressores de tumores críticos, como o CDKN2, o CDKN2B e o MTAP. Estas deleções são comuns no cancro da bexiga e são cruciais para a compreensão dos mecanismos moleculares subjacentes à tumorigénese. Por exemplo, a perda de CDKN2 e CDKN2B está associada à desregulação do ciclo celular, que é um evento-chave na progressão do cancro. Além disso, as células HT-1376 foram estudadas pela sua expressão da proteína p16, um produto do gene CDKN2, que é frequentemente correlacionado com a ausência de expressão de pRb, outra proteína supressora de tumores.

A linha celular HT-1376 também tem sido utilizada na investigação virológica para avaliar a presença de vírus tumorais, embora não tenha sido detectada qualquer expressão de vírus nestas células. Isto faz da HT-1376 um modelo valioso para estudar os mecanismos não virais do desenvolvimento e progressão do cancro da bexiga. As alterações genéticas da linha celular e a sua capacidade de crescimento in vitro e in vivo proporcionam uma plataforma robusta para estudos pré-clínicos, incluindo o ensaio de medicamentos e a exploração de novas estratégias terapêuticas que visam vias genéticas específicas do cancro da bexiga.

Tecido
Bexiga urinária
Doença
Carcinoma da bexiga
Sinónimos
  • HT1376
  • HT 1376
  • HT 1376.T

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Sim
Tempo de duplicação
31 horas

04Identificadores

Referência
HT-1376 (número de catálogo da Cytion 305100)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1292

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Atividade fibrinolítica, interferão

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
58 anos
Etnia
Europeu