Mine otse sisu juurde
HT-1376
Kude
Uriinipõie
Haigus
Põie kartsinoom
Sünonüümid
HT1376, HT 1376, HT 1376.T

Dokumendid

HT-1376

Cell line · Toote number 305100

The HT-1376 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a grade 3 transitional cell carcinoma. This cell line was established from a...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HT-1376 rakuliin on saadud inimese põiekartsinoomist, täpsemalt 3. astme üleminekurakkude kartsinoomist. See rakuliin loodi kasvajast, mis saadi transuretraalse resektsiooni teel täiskasvanud naispatsiendilt, kellel oli varem invasiivne põiekartsinoom. HT-1376 rakkudel on epiteeliomadused, sealhulgas mikrovillide ja toonofibrillide olemasolu, mis viitab nende epiteeli päritolule. Lisaks on neil rakkudel mitu markerkromosoomi, mis eristavad neid teistest teadaolevatest kasvajarakkude liinidest. HT-1376 rakud kasvavad teadaolevalt ka pehmel agaril ja on väga tumorigeensed, moodustades immuunpuudega hiirtele ja hamstritele süstimisel kasvajaid.

HT-1376 on oluline põievähi uurimisel selle geneetilise profiili tõttu, mis hõlmab märkimisväärseid muutusi kromosoomi 9p21 piirkonnas. Selles piirkonnas esineb sageli suuri homosügootseid deletsioone, mis viivad kriitiliste kasvajasupressorgeenide, nagu CDKN2, CDKN2B ja MTAP, inaktiveerumiseni. Need deletsioonid on põievähi puhul tavalised ja on olulised kasvajate tekke aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide mõistmiseks. Näiteks CDKN2 ja CDKN2B kadumine on seotud rakutsükli düsregulatsiooniga, mis on vähi progresseerumise võtmesündmus. Lisaks on HT-1376 rakkudes uuritud CDKN2 geeni toote p16 valgu ekspressiooni, mis on sageli korrelatsioonis teise kasvajasupressorvalgu pRb ekspressiooni puudumisega.

HT-1376 rakuliini on kasutatud ka viroloogiauuringutes, et hinnata kasvajaviiruste olemasolu, kuigi nendes rakkudes ei ole tuvastatud viiruse ekspressiooni. See muudab HT-1376 väärtuslikuks mudeliks põievähi arengu ja progresseerumise mitte-viiruslike mehhanismide uurimiseks. Rakuliini geneetilised muutused ja selle võime kasvada in vitro ja in vivo annavad tugeva platvormi prekliinilisteks uuringuteks, sealhulgas ravimite testimiseks ja uute ravistrateegiate uurimiseks, mis on suunatud põievähi konkreetsetele geneetilistele radadele.

Kude
Uriinipõie
Haigus
Põie kartsinoom
Sünonüümid
  • HT1376
  • HT 1376
  • HT 1376.T

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah
Kahekordistumisaeg
31 tundi

04Tunnused

Viide
HT-1376 (Cytioni kataloognumber 305100)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1292

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Fibrinolüütiline aktiivsus, interferoon

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
58 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa