Přejít na obsah
HT-1376
Tkáň
Močový měchýř
Nemoc
Karcinom močového měchýře
Synonyma
HT1376, HT 1376, HT 1376.T

Dokumenty

HT-1376

Cell line · Číslo výrobku 305100

The HT-1376 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a grade 3 transitional cell carcinoma. This cell line was established from a...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie HT-1376 je odvozena z lidského karcinomu močového měchýře, konkrétně z karcinomu z přechodných buněk 3. stupně. Tato buněčná linie byla vytvořena z nádoru získaného transuretrální resekcí od dospělé pacientky, která měla v anamnéze invazivní karcinom močového měchýře. Buňky HT-1376 vykazují epiteliální vlastnosti, včetně přítomnosti mikrovilů a tonofibril, které svědčí o jejich epiteliálním původu. Kromě toho tyto buňky vykazují několik markerových chromozomů, které je odlišují od jiných známých nádorových buněčných linií. O buňkách HT-1376 je také známo, že rostou v měkkém agaru a jsou vysoce tumorigenní a vytvářejí nádory po injekčním podání imunokompromitovaným myším a křečkům.

HT-1376 je významná ve výzkumu rakoviny močového měchýře díky svému genetickému profilu, včetně pozoruhodných změn v chromozomální oblasti 9p21. V této oblasti často dochází k rozsáhlým homozygotním delecím, což vede k inaktivaci kritických tumor supresorových genů, jako jsou CDKN2, CDKN2B a MTAP. Tyto delece jsou u karcinomu močového měchýře běžné a mají zásadní význam pro pochopení molekulárních mechanismů, které jsou základem nádorového bujení. Například ztráta CDKN2 a CDKN2B je spojena s dysregulací buněčného cyklu, což je klíčová událost při progresi rakoviny. Dále byla u buněk HT-1376 studována exprese proteinu p16, produktu genu CDKN2, která často koreluje s absencí exprese pRb, dalšího nádorového supresorového proteinu.

Buněčná linie HT-1376 byla také použita ve virologickém výzkumu k posouzení přítomnosti nádorových virů, ačkoli v těchto buňkách nebyla zjištěna žádná exprese virů. Díky tomu je HT-1376 cenným modelem pro studium nevirových mechanismů vývoje a progrese rakoviny močového měchýře. Genetické změny buněčné linie a její schopnost růstu in vitro a in vivo poskytují robustní platformu pro preklinické studie, včetně testování léčiv a zkoumání nových terapeutických strategií zaměřených na specifické genetické dráhy u rakoviny močového měchýře.

Tkáň
Močový měchýř
Nemoc
Karcinom močového měchýře
Synonyma
  • HT1376
  • HT 1376
  • HT 1376.T

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové
Tumorogenní
Ano
Doba zdvojnásobení
31 hodin

04Identifikátory

Citace
HT-1376 (katalogové číslo Cytion 305100)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1292

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Fibrinolytická aktivita, interferon

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
58 let
Etnická příslušnost
Evropská