HT-1376
Cell line · Preces numurs 305100
The HT-1376 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a grade 3 transitional cell carcinoma. This cell line was established from a...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HT-1376Cell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HT-1376 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka urīnpūšļa karcinomas, īpaši 3. pakāpes pārejas šūnu karcinomas. Šī šūnu līnija tika izveidota no audzēja, kas iegūts, veicot transuretrālo rezekciju pieaugušai pacientei, kurai bija invazīva urīnpūšļa karcinoma. HT-1376 šūnām piemīt epitēlija pazīmes, tostarp mikroviļi un tonofibrilles, kas norāda uz to epitēlija izcelsmi. Turklāt šīm šūnām ir vairākas marķieru hromosomas, kas tās atšķir no citām zināmajām audzēju šūnu līnijām. HT-1376 šūnas aug arī mīkstā agārā un ir ļoti tumorigēnas, veidojot audzējus, ja tās injicē imūnkompromitētām pelēm un kāmjiem.
HT-1376 ir nozīmīga urīnpūšļa vēža pētniecībā, jo tās ģenētiskais profils ietver ievērojamas izmaiņas 9p21 hromosomu reģionā. Šajā reģionā bieži vien notiek lielas homozigotiskas delecijas, kas izraisa tādu kritiski svarīgu audzēja supresoru gēnu kā CDKN2, CDKN2B un MTAP inaktivāciju. Šādas delecijas ir izplatītas urīnpūšļa vēža gadījumā, un tās ir ļoti svarīgas, lai izprastu molekulāros mehānismus, kas ir audzēja rašanās pamatā. Piemēram, CDKN2 un CDKN2B zudums ir saistīts ar šūnas cikla traucējumiem, kas ir galvenais vēža progresēšanas faktors. Turklāt HT-1376 šūnās ir pētīta CDKN2 gēna CDKN2 produkta proteīna p16 ekspresija, kas bieži ir saistīta ar cita audzēja supresora proteīna pRb ekspresijas trūkumu.
HT-1376 šūnu līniju izmanto arī virusoloģijas pētījumos, lai novērtētu audzēju vīrusu klātbūtni, lai gan šūnās nav konstatēta vīrusu ekspresija. Tas padara HT-1376 par vērtīgu modeli, lai pētītu urīnpūšļa vēža attīstības un progresēšanas mehānismus, kas nav saistīti ar vīrusiem. Šūnu līnijas ģenētiskās izmaiņas un tās spēja augt in vitro un in vivo nodrošina stabilu platformu pirmsklīniskajiem pētījumiem, tostarp zāļu testēšanai un jaunu terapeitisko stratēģiju izpētei, kas vērstas uz specifiskiem urīnpūšļa vēža ģenētiskajiem ceļiem.
- Audums
- Urīnpūslis
- Slimība
- Urīnpūšļa karcinoma
- Sinonīmi
- HT1376
- HT 1376
- HT 1376.T
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlija
- Tumorogēns
- Jā
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- 31 stunda
04Identifikatori
- Atsauce
- HT-1376 (Cytion kataloga numurs 305100)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1292
05Pazīmes un uzņēmība
- Proteīnu ekspresija
- Fibrinolītiskā aktivitāte, interferons
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 58 gadi
- Etniskā piederība
- Eiropas
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
