Pāriet uz saturu
HT-1376
Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
HT1376, HT 1376, HT 1376.T

Dokumenti

HT-1376

Cell line · Preces numurs 305100

The HT-1376 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a grade 3 transitional cell carcinoma. This cell line was established from a...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HT-1376 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka urīnpūšļa karcinomas, īpaši 3. pakāpes pārejas šūnu karcinomas. Šī šūnu līnija tika izveidota no audzēja, kas iegūts, veicot transuretrālo rezekciju pieaugušai pacientei, kurai bija invazīva urīnpūšļa karcinoma. HT-1376 šūnām piemīt epitēlija pazīmes, tostarp mikroviļi un tonofibrilles, kas norāda uz to epitēlija izcelsmi. Turklāt šīm šūnām ir vairākas marķieru hromosomas, kas tās atšķir no citām zināmajām audzēju šūnu līnijām. HT-1376 šūnas aug arī mīkstā agārā un ir ļoti tumorigēnas, veidojot audzējus, ja tās injicē imūnkompromitētām pelēm un kāmjiem.

HT-1376 ir nozīmīga urīnpūšļa vēža pētniecībā, jo tās ģenētiskais profils ietver ievērojamas izmaiņas 9p21 hromosomu reģionā. Šajā reģionā bieži vien notiek lielas homozigotiskas delecijas, kas izraisa tādu kritiski svarīgu audzēja supresoru gēnu kā CDKN2, CDKN2B un MTAP inaktivāciju. Šādas delecijas ir izplatītas urīnpūšļa vēža gadījumā, un tās ir ļoti svarīgas, lai izprastu molekulāros mehānismus, kas ir audzēja rašanās pamatā. Piemēram, CDKN2 un CDKN2B zudums ir saistīts ar šūnas cikla traucējumiem, kas ir galvenais vēža progresēšanas faktors. Turklāt HT-1376 šūnās ir pētīta CDKN2 gēna CDKN2 produkta proteīna p16 ekspresija, kas bieži ir saistīta ar cita audzēja supresora proteīna pRb ekspresijas trūkumu.

HT-1376 šūnu līniju izmanto arī virusoloģijas pētījumos, lai novērtētu audzēju vīrusu klātbūtni, lai gan šūnās nav konstatēta vīrusu ekspresija. Tas padara HT-1376 par vērtīgu modeli, lai pētītu urīnpūšļa vēža attīstības un progresēšanas mehānismus, kas nav saistīti ar vīrusiem. Šūnu līnijas ģenētiskās izmaiņas un tās spēja augt in vitro un in vivo nodrošina stabilu platformu pirmsklīniskajiem pētījumiem, tostarp zāļu testēšanai un jaunu terapeitisko stratēģiju izpētei, kas vērstas uz specifiskiem urīnpūšļa vēža ģenētiskajiem ceļiem.

Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
  • HT1376
  • HT 1376
  • HT 1376.T

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
31 stunda

04Identifikatori

Atsauce
HT-1376 (Cytion kataloga numurs 305100)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1292

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Fibrinolītiskā aktivitāte, interferons

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
58 gadi
Etniskā piederība
Eiropas