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HT-1376
Tessuto
Vescica urinaria
Malattia
Carcinoma della vescica
Sinonimi
HT1376, HT 1376, HT 1376.T

Documenti

HT-1376

Cell line · Codice prodotto 305100

The HT-1376 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a grade 3 transitional cell carcinoma. This cell line was established from a...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HT-1376 deriva da un carcinoma vescicale umano, nello specifico un carcinoma a cellule transizionali di grado 3. Questa linea cellulare è stata creata da un tumore ottenuto tramite resezione transuretrale da una paziente adulta di sesso femminile con una storia di carcinoma vescicale invasivo. Le cellule HT-1376 presentano caratteristiche epiteliali, tra cui la presenza di microvilli e tonofibrille, che sono indicative della loro origine epiteliale. Inoltre, queste cellule mostrano diversi cromosomi marcatori, che le distinguono da altre linee cellulari tumorali conosciute. Le cellule HT-1376 sono anche note per crescere in agar morbido e sono altamente tumorigeniche, formando tumori quando vengono iniettate in topi e criceti immunocompromessi.

HT-1376 è importante per la ricerca sul cancro della vescica a causa del suo profilo genetico, che comprende notevoli alterazioni nella regione cromosomica 9p21. Questa regione è spesso soggetta a grandi delezioni omozigoti, che portano all'inattivazione di geni soppressori del tumore critici come CDKN2, CDKN2B e MTAP. Queste delezioni sono comuni nel cancro della vescica e sono cruciali per la comprensione dei meccanismi molecolari alla base della tumorigenesi. Ad esempio, la perdita di CDKN2 e CDKN2B è associata alla disregolazione del ciclo cellulare, che è un evento chiave nella progressione del cancro. Inoltre, le cellule HT-1376 sono state studiate per la loro espressione della proteina p16, un prodotto del gene CDKN2, che è spesso correlata all'assenza di espressione di pRb, un'altra proteina soppressore del tumore.

La linea cellulare HT-1376 è stata anche utilizzata nella ricerca virologica per valutare la presenza di virus tumorali, sebbene non sia stata rilevata l'espressione di virus in queste cellule. Ciò rende HT-1376 un modello prezioso per studiare i meccanismi non virali dello sviluppo e della progressione del tumore della vescica. Le alterazioni genetiche della linea cellulare e la sua capacità di crescere in vitro e in vivo forniscono una solida piattaforma per studi preclinici, tra cui la sperimentazione di farmaci e l'esplorazione di nuove strategie terapeutiche mirate a specifiche vie genetiche del cancro alla vescica.

Tessuto
Vescica urinaria
Malattia
Carcinoma della vescica
Sinonimi
  • HT1376
  • HT 1376
  • HT 1376.T

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
Sì
Tempo di raddoppio
31 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HT-1376 (numero di catalogo Cytion 305100)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1292

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Attività fibrinolitica, interferone

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
58 anni
Etnia
Europeo