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Células HNO97
Tecido
Língua
Doença
Carcinoma espinocelular da cabeça e do pescoço (HNSCC)
Sinónimos
HNO 97

Documentos

Células HNO97

Cell line · Número do produto 300129

A linha celular HNO97 é derivada de um carcinoma espinocelular oral, um subtipo de carcinoma espinocelular da cabeça e pescoço (HNSCC). Esta linha celular tem sido...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular HNO97 é derivada de um carcinoma oral de células escamosas, um subtipo de carcinoma de células escamosas da cabeça e do pescoço (HNSCC). Esta linha celular foi caracterizada por várias anomalias cromossómicas, incluindo ganhos no número de cópias de ADN em regiões como 3p25-pter, 3q, 5p, 9q22-qter, 10p, 10q, 11cen-p14, 20p e 20q, juntamente com uma perda significativa do número de cópias na região 18q. Estas alterações genéticas são consistentes com as frequentemente observadas em formas agressivas de CECP e estão associadas a oncogenes-chave envolvidos na progressão do tumor, incluindo os implicados na regulação do ciclo celular e na proliferação.

O HNO97 tem sido amplamente utilizado em estudos centrados na orientação específica de tumores e na ligação de péptidos. Por exemplo, a linha celular HNO97 foi fundamental para a identificação e caraterização do péptido HBP-1, que se liga especificamente às células HNSCC e mostra potencial para utilização em terapias direcionadas. A cinética de ligação do HBP-1 às células HNO97 revelou uma rápida internalização, tornando esta linha celular um modelo valioso para investigar a eficácia de novos agentes terapêuticos destinados a alvos moleculares específicos nos tumores HNSCC .

Além disso, a HNO97 foi utilizada em estudos de biodistribuição com ratinhos nus portadores de tumores, nos quais se demonstrou que determinados peptídeos, como o HBP-1, se acumulam preferencialmente nos tumores da HNO97, o que realça a sua utilidade em modelos pré-clínicos para a administração de fármacos e estudos de imagiologia. O perfil genético e molecular desta linha celular torna-a uma ferramenta importante para o estudo da biologia do cancro oral e para o desenvolvimento de tratamentos específicos.

Tecido
Língua
Doença
Carcinoma espinocelular da cabeça e do pescoço (HNSCC)
Sinónimos
  • HNO 97

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
HNO97 (número de catálogo Cytion 300129)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_D227

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
72 anos
Etnia
Caucasiano