Bunky PC-3: In vitro model androgénne nezávislej rakoviny prostaty

Bunka PC-3 bola izolovaná z kostnej metastázy 62-ročného muža kaukazského pôvodu s adenokarcinómom prostaty štádia IV v roku 1979. Tento pôvod je významný, pretože odráža vysoký metastatický potenciál tejto buneckej línie, čo zodpovedá agresívnej povahe rakoviny prostaty v pokročilom štádiu, z ktorej bola získaná.

Charakteristika

• Nereagujú na androgénny receptor (AR): Bunky PC-3 sa vyznačujú tým, že nereagujú na androgény, čo sú mužské hormóny, ako napríklad testosterón. To svedčí o pokročilom štádiu rakoviny prostaty, v ktorom sa rakovina rozvíja nezávisle od týchto hormónov.
• Reakcie na rastové faktory: Napriek tomu, že bunky PC-3 nereagujú na androgény, ovplyvňujú ich epidermálne rastové faktory, ktoré môžu mať vplyv na ich proliferáciu a prežívanie.
• Morfológia: Vyznačujú sa morfológiou podobnou epitelu, typickou pre bunky, ktoré vystielajú povrchy orgánov a štruktúr v tele, čo je vzhľadom na ich pôvod z adenokarcinómu – typu rakoviny, ktorá sa tvorí v žľazách vylučujúcich hlien – očakávané.
• Veľkosť: Bunky sú relatívne veľké, s priemerom v rozmedzí 15,1 až 16,6 µm, čo môže byť dôležitým faktorom pri experimentálnych nastaveniach, ako sú štúdie efektívnosti transfekcie a absorpcie liekov.
• Chromozómové charakteristiky: Bunky PC-3 sú takmer triploidné s modálnym počtom chromozómov 62. Prítomnosť približne 20 markerových chromozómov a absencia normálnych chromozómov N2, N3, N4, N5, N12 a N15 podčiarkujú ich genetickú nestabilitu, čo je charakteristický znak rakovinových buniek.

Porovnanie s inými bunkovými líniami rakoviny prostaty

• PC-3 vs. LNCaP:

  • Metastatický potenciál: Bunky LNCaP majú v porovnaní s PC-3 nižší metastatický potenciál, vďaka čomu sú bunky PC-3 vhodnejšie na štúdium mechanizmov metastázovania a testovanie liekov zameraných na prevenciu šírenia rakoviny.

  • Reakcia na androgény: Bunky LNCaP exprimujú androgénové receptory a prostatický špecifický antigén (PSA), čo sú markery luminálnej diferenciácie a reakcie na androgény, na rozdiel od androgénovej nezávislosti buniek PC-3.

• PC-3 vs. DU145:

  • Expresia androgénnych receptorov: Podobne ako bunky karcinómu ľudskej prostaty PC-3, aj bunky DU145 sú negatívne na androgénne receptory, čo zodpovedá modelu karcinómov prostaty nezávislých na androgénnej deplecii (ADI).

  • Metastatický potenciál: Hoci sa obe bunky používajú na štúdium karcinómov prostaty typu ADI, bunky PC-3 majú vyšší metastatický potenciál ako bunky DU145, čo ich robí obzvlášť užitočnými pre výskum agresívnych foriem rakoviny.

Vlastnosti buneckej línie PC-3, ako sú necitlivosť na androgénny receptor, vysoký metastatický potenciál a špecifické chromozómové aberácie, z nej robia neoceniteľný model na štúdium mechanizmov pokročilého karcinómu prostaty a testovanie nových terapeutických stratégií.

Pohyb buniek rakoviny prostaty PC3 za pomoci mikrofilamentov.

Kultivácia buniek PC3

Bunka PC-3 je základnou súčasťou laboratórií zaoberajúcich sa výskumom rakoviny vďaka jej významu pri štúdiu rakoviny prostaty. Kultivácia tejto buneckej línie si vyžaduje presné podmienky, aby sa zabezpečila životaschopnosť buniek a presné výsledky experimentov. Nižšie nájdete základné informácie o kultivácii buniek PC-3, vrátane pokynov týkajúcich sa ich doby zdvojnásobenia, hustoty výsevu, rastového média a postupov zmrazovania, rozmrazovania a skladovania.

Kľúčové body kultivácie buniek PC-3

• Doba zdvojnásobenia populácie: Bunky PC-3 majú približnú dobu zdvojnásobenia 40 hodín, čo je kľúčové pre plánovanie harmonogramu subkultivácie.

• Adhézia: Hoci sú bunky PC-3 typicky adhezívne, dokážu sa prispôsobiť rastu v suspenzných kultúrach, čo poskytuje flexibilitu pri voľbe kultivačných metód.

• Hustota výsevu: Na založenie novej kultúry PC-3 je potrebná hustota výsevu 3 × 10⁴ buniek/cm². Pri subkultivácii sa udržiava nižšia hustota 1 × 10⁴ buniek/cm².

• Získanie buniek a naočkovanie: Na subkultiváciu adhezívnych buniek sa bunky premyjú PBS a ošetria sa TrypleExpressom alebo Accutase. Po oddelení sa bunky zozbierajú centrifugáciou, resuspendujú a naočkujú do nových fliaš s rastovým médiom.

• Rastové médium: Bunky PC-3 sa dobre rozmnožujú v médiách DMEM alebo Ham’s F12, doplnených o 5 % FBS a 2,5 mM L-glutamínu.

• Podmienky rastu: Optimálny rast sa dosahuje pri teplote 37 °C vo zvlhčenom inkubátore s prísunom 5 % CO₂.

• Skladovanie: Pre dlhodobú životaschopnosť sa bunky PC-3 kryokonzervujú v parnej fáze tekutého dusíka pri teplotách pod -150 °C.

• Proces zmrazovania: Odporúča sa proces zmrazovania s kontrolovanou rýchlosťou, ktorý zahŕňa postupné znižovanie teploty o 1 °C za minútu s použitím CM-1 alebo CM-ACF ako zmrazovacieho média.

• Proces rozmrazovania: Pri rozmrazovaní sa injekčné liekovky premiešavajú vo vodnom kúpeli pri teplote 37 °C, kým nezostane len malá hrudka ľadu. Po zriedení čerstvým médiom sa bunky odstreďujú na odstránenie mraziaceho média a resuspendujú sa v rastovom médiu na kultiváciu.

• Bezpečnostné opatrenia v oblasti biologickej bezpečnosti: Kultivácia buniek PC-3 vyžaduje laboratórne prostredie s úrovňou biologickej bezpečnosti minimálne 1, aby bolo zabezpečené bezpečné pracovné prostredie.

Dodržiavaním týchto kľúčových bodov môžu výskumníci úspešne kultivovať a udržiavať bunky PC-3, čo uľahčuje štúdium biológie a liečby rakoviny prostaty.

Bunky PC-3 v rôznych štádiách konfluencie po 1 dni a 3 dňoch kultivácie.

Uverejnené: 2023 | Posledná revízia: máj 2026

Bunky PC3: Preskúmanie výhod a výziev

Výhody buniek PC-3

• Metastatický potenciál: Bunky PC-3 sú známe svojím významným metastatickým potenciálom. Vďaka tomu sú mimoriadne užitočné pri skúmaní zložitých procesov, ktoré riadia metastázovanie rakoviny, a poskytujú realistický model na štúdium šírenia nádoru.

• Modelovanie androgénne nezávislej rakoviny: Ako reprezentácia androgénne nezávislej rakoviny prostaty sú bunky PC-3 kľúčové pre pochopenie tohto agresívneho typu rakoviny. Chýbajúca expresia androgénneho receptora (AR) a prostatického špecifického antigénu (PSA) umožňuje výskumníkom študovať správanie rakovinových buniek, ktoré nie je ovplyvnené androgénmi, a poskytuje tak pohľad na mechanizmy rezistencie voči štandardným terapiám.

• Účinnosť transfekcie: Bunky línie PC-3 sú mimoriadne vnímavé na transfekciu, čo z nich robí vynikajúci nástroj na genetickú manipuláciu a štúdie génovej expresie, čo je kľúčové pre odhalenie funkcií rôznych génov a ich príspevku k progresii rakoviny.

• Jednoduchosť kultivácie: Tieto bunky sú v laboratórnych podmienkach užívateľsky prívetivé a na ich udržiavanie nevyžadujú žiadne špecializované postupy, čo zjednodušuje ich používanie a robí ich dostupnými pre rôzne experimenty.

Výzvy spojené s bunkami PC-3

• Nereagovanie na androgénnu stimuláciu: Vzhľadom na absenciu receptora androgénu (AR) nie sú bunky PC-3 vhodné pre štúdie, ktoré vyžadujú pochopenie mechanizmov androgén-dependentného karcinómu prostaty, čo môže predstavovať významné obmedzenie pri skúmaní celého spektra typov karcinómu prostaty.

• Rýchla proliferácia: Rýchla rýchlosť rastu buniek PC-3 môže viesť k nadmernému zhlukovaniu, čo môže narušiť správanie buniek a génovú expresiu, čím sa môže potenciálne ovplyvniť konzistentnosť a spoľahlivosť experimentálnych výsledkov.

Výskumné využitie buniek PC-3

• Modely nádorových xenotransplantátov: Bunky PC-3 zohrávajú kľúčovú úlohu pri vytváraní subkutánnych nádorových modelov u myší, čím poskytujú neoceniteľný zdroj na skúmanie mikroprostredia nádoru a testovanie účinnosti nových liekov. Tieto modely sú obzvlášť užitočné pri hodnotení prírodných zlúčenín, ako je α-pinen, z hľadiska ich protinádorových vlastností.

• Porozumenie biológii rakoviny: Štúdium bunkových mechanizmov rakoviny prostaty je vďaka použitiu buniek PC-3 obohatené. Tieto bunky zohrávajú kľúčovú úlohu pri objasňovaní úlohy dlhých nekódujúcich RNA a špecifických génov v správaní rakovinových buniek, čím poukazujú na potenciálne nové ciele liečby.

• Objavovanie a validácia liekov: Bunky línie PC-3 sa bežne používajú pri skríningu a validácii nových kandidátov na lieky. Štúdie napríklad preukázali účinnosť rastlinných extraktov, ako sú napríklad extrakty z rozmarínu, pri inhibícii proliferácie týchto rakovinových buniek, čo naznačuje možné terapeutické využitie.

Zdôraznením silných stránok a výziev spojených s bunkami PC-3 môžu výskumníci prijímať informované rozhodnutia o ich použití v rôznych experimentálnych kontextoch, od základnej biológie až po predklinické testovanie nových terapeutických látok.

Podporte svoje laboratórne objavy pomocou našej bunkovej línie PC-3.

Vedecké publikácie zaoberajúce sa bunkami PC-3

• α-Pinen inhibuje rast rakoviny prostaty u ľudí v myším xenotransplantačnom modeli : Táto štúdia, uverejnená v časopise Chemotherapy Journal v roku 2018, skúma, ako α-pinen ovplyvňuje progresiu rakoviny prostaty v myšom modeli PC-3.
• Kvercetín zosilňuje terapeutické účinky paklitaxelu na rakovinu prostaty PC-3 prostredníctvom indukcie stresu ER a produkcie ROS : Táto publikácia naznačuje, že kombinácia paklitaxelu a kvercetínu má synergický účinok v boji proti rakovine prostaty.
• Zingerón potláča bunkovú proliferáciu prostredníctvom indukcie bunkovej apoptózy a inhibície signálnej dráhy PI3K/AKT/mTOR v bunkách ľudského karcinómu prostaty PC-3 : Tento výskum, uverejnený v časopise „Journal of Biochemical and Molecular Toxicology“ (2021), skúma antiproliferatívne účinky zingerónu.
• TRPM 4 reguluje aktivitu Akt/GSK 3-β a zvyšuje signálnu dráhu β-katenínu a proliferáciu buniek v bunkách rakoviny prostaty : Ako bolo uvedené v časopise Molecular Oncology v roku 2018, táto štúdia sa zameriava na úlohu génu TRPM 4 v proliferácii buniek PC-3.
• Extrakt z koreňa mikropropagovanej liečivej rastliny Prunus africana indukoval apoptózu v ľudských bunkách rakoviny prostaty (PC-3) prostredníctvom aktivácie kaspázy-3 : Táto štúdia z roku 2022 uverejnená v časopise „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ naznačuje, že extrakt z Prunus africana môže indukovať apoptózu v bunkách PC-3.

Komplexný sprievodca zdrojmi týkajúcimi sa bunkovej línie PC-3

Bunka PC-3 je známa svojím významným prínosom vo výskume rakoviny prostaty a v rôznych ďalších vedeckých štúdiách. K dispozícii je množstvo zdrojov, ktoré pomáhajú výskumníkom pri efektívnej manipulácii, udržiavaní a práci s touto bunkovou líniou. Nasledujúce zdroje boli vybrané s cieľom poskytnúť usmernenia pre rôzne laboratórne postupy zahŕňajúce bunky PC-3.

• Kultivácia buniek PC-3: Toto inštruktážne video poskytuje jasnú ukážku protokolov subkultivácie alebo pasážovania, ktoré sú nevyhnutné na udržanie vitality buniek rakoviny prostaty PC-3.
• Príručka na kryokonzerváciu buniek: Toto komplexné video slúži ako podrobný návod na správne postupy zmrazovania buniek, čím sa zabezpečí ich uchovanie pre budúci výskum.
• Protokoly pre transfekciu buniek PC-3: Tento zdroj opisuje podrobné protokoly pre transfekciu buniek PC-3, vrátane optimálneho použitia reagencií a techniky.
• Návod na transfekciu buniek PC-3: Vzdelávacie video ponúkajúce pohľad na proces in vitro transfekcie buniek PC-3, ktoré pomáha lepšie pochopiť štúdie génovej expresie.

Protokoly pre udržiavanie bunkových kultúr

Konkrétne podrobnosti o protokoloch kultivácie buniek PC-3 nájdete na nižšie uvedenom odkaze.

• Subkultivácia buniek PC-3: Získajte prístup k stručnému súboru protokolov pre subkultiváciu, zmrazenie a rozmrazenie buniek PC-3, ktoré sú kľúčové pre kontinuitu bunkovej kultúry a experimentovanie.

Často kladené otázky o bunkách PC3

Referencie

1. Tai, S., et al., PC3 je bunková línia charakteristická pre malobunkový karcinóm prostaty. The Prostate, 2011. 71(15): s. 1668–1679.
2. Litvinov, I.V., et al., Ľudské bunky rakoviny prostaty PC3, na rozdiel od buniek DU145, si zachovávajú koregulátory potrebné pre tumor-supresorovú schopnosť androgénneho receptora. The Prostate, 2006. 66(12): s. 1329–1338.
3. Zhao, Y., a kol., α-Pinen inhibuje rast ľudského karcinómu prostaty v myším xenotransplantačnom modeli. Chemotherapy, 2018. 63(1): s. 1–7.
4. Xing, P., et al., Potlačenie expresie lncRNA MIR4435‑2HG a ST8SIA1 inhibuje proliferáciu, inváziu a migráciu buniek rakoviny prostaty in vitro a in vivo blokovaním aktivácie signálnej dráhy FAK/AKT/β‑katenín. International Journal of Molecular Medicine, 2021. 47(6): s. 1–13.
5. Qian, S., et al., Zingerón potláča bunkovú proliferáciu prostredníctvom indukcie bunkovej apoptózy a inhibície signálnej dráhy PI3K/AKT/mTOR v bunkách ľudského karcinómu prostaty PC-3. Journal of Biochemical and Molecular Toxicology, 2021. 35(1): s. e22611.
6. Jaglanian, A., D. Termini a E. Tsiani, Extrakt z rozmarínu (Rosmarinus officinalis L.) inhibuje proliferáciu a prežívanie buniek rakoviny prostaty tým, že pôsobí na Akt a mTOR. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2020. 131: s. 110717.