Buňky PC-3: in vitro model androgen-nezávislého karcinomu prostaty

Buněčná linie PC-3 byla v roce 1979 izolována z kostní metastázy 62letého muže kavkazského původu s adenokarcinomem prostaty IV. stupně. Tento původ je významný, protože odráží vysoký metastatický potenciál této buněčné linie, který odpovídá agresivní povaze pokročilého stadia rakoviny prostaty, z níž byla získána.

Charakteristika

• Nereagují na androgenní receptor (AR): Buňky PC-3 se vyznačují tím, že nereagují na androgeny, což jsou mužské hormony, jako je testosteron. To svědčí o pokročilém stadiu rakoviny prostaty, kdy se rakovina rozvíjí nezávisle na těchto hormonech.
• Reakce na růstové faktory: Navzdory své nereagovatelnosti na androgeny jsou buňky PC-3 ovlivňovány epidermálními růstovými faktory, které mohou ovlivňovat jejich proliferaci a přežití.
• Morfologie: Vyznačují se epiteliální morfologií, typickou pro buňky, které vystýlají povrchy orgánů a struktur v těle, což je vzhledem k jejich původu z adenokarcinomu – typu rakoviny, který se tvoří v žlázách vylučujících hlen – očekávané.
• Velikost: Buňky jsou relativně velké, s průměrem v rozmezí 15,1 až 16,6 µm, což může být důležitým faktorem při experimentálních uspořádáních, jako jsou studie účinnosti transfekce a vychytávání léčiv.
• Chromozomální vlastnosti: Buňky PC-3 jsou téměř triploidní s modálním počtem chromozomů 62. Přítomnost přibližně 20 markerových chromozomů a absence normálních chromozomů N2, N3, N4, N5, N12 a N15 podtrhuje jejich genetickou nestabilitu, což je charakteristický rys rakovinných buněk.

Srovnání s jinými buněčnými liniemi rakoviny prostaty

• PC-3 vs. LNCaP:

  • Metastatický potenciál: Buňky LNCaP mají ve srovnání s buňkami PC-3 nižší metastatický potenciál, díky čemuž jsou buňky PC-3 vhodnější pro studium mechanismů metastázování a testování léčiv zaměřených na prevenci šíření rakoviny.

  • Reakce na androgeny: Buňky LNCaP exprimují androgenní receptory a prostatický specifický antigen (PSA), což jsou markery luminální diferenciace a reakce na androgeny, na rozdíl od androgenní nezávislosti buněk PC-3.

• PC-3 vs. DU145:

  • Exprese androgenních receptorů: Podobně jako buňky karcinomu lidské prostaty PC-3 jsou i buňky DU145 negativní na androgenní receptory, což odpovídá modelu karcinomů prostaty nezávislých na androgenech (ADI).

  • Metastatický potenciál: Ačkoli se obě buněčné linie používají ke studiu karcinomů prostaty typu ADI, buňky PC-3 mají vyšší metastatický potenciál než buňky DU145, což je činí obzvláště užitečnými pro výzkum agresivních forem rakoviny.

Vlastnosti buněčné linie PC-3, jako je nereagování na androgenní receptory, vysoký metastatický potenciál a specifické chromozomální aberace, z ní činí neocenitelný model pro studium mechanismů pokročilého karcinomu prostaty a testování nových terapeutických strategií.

Pohyb buněk rakoviny prostaty PC3 za pomoci mikrofilamentů.

Kultivace buněk PC3

Buněčná linie PC-3 je díky svému významu pro výzkum rakoviny prostaty nepostradatelnou součástí laboratoří zabývajících se výzkumem rakoviny. Kultivace této buněčné linie vyžaduje přesné podmínky, aby byla zajištěna životaschopnost buněk a přesné výsledky experimentů. Níže najdete základní informace o kultivaci buněk PC-3, včetně pokynů týkajících se doby zdvojnásobení, hustoty výsevu, růstového média a postupů pro zmrazení, rozmrazení a skladování.

Klíčové body pro kultivaci buněk PC-3

• Doba zdvojnásobení populace: Buňky PC-3 mají přibližnou dobu zdvojnásobení 40 hodin, což je zásadní pro plánování harmonogramu subkultivace.

• Adheze: Ačkoli jsou buňky PC-3 typicky adhezivní, mohou se přizpůsobit růstu v suspenzních kulturách, což nabízí flexibilitu v metodách kultivace.

• Hustota výsevu: Zahájení nové kultury buněk PC-3 vyžaduje hustotu výsevu 3 × 10⁴ buněk/cm². Pro subkultivaci se udržuje nižší hustota 1 × 10⁴ buněk/cm².

• Získání buněk a naočkování: Pro subkultivaci adhezivních buněk se tyto promyjí PBS a ošetří přípravkem TrypleExpress nebo Accutase. Po odloučení se buňky shromáždí odstředěním, resuspendují a naočkují do nových lahví s růstovým médiem.

• Růstové médium: Buňky PC-3 se dobře rozmnožují v médiích DMEM nebo Ham’s F12, doplněných 5 % FBS a 2,5 mM L-glutaminu.

• Podmínky růstu: Optimálního růstu se dosahuje při teplotě 37 °C ve zvlhčeném inkubátoru s přívodem 5 % CO₂.

• Skladování: Pro zajištění dlouhodobé životaschopnosti se buňky PC-3 kryokonzervují v plynné fázi kapalného dusíku při teplotách pod -150 °C.

• Proces zmrazování: Doporučuje se proces zmrazování s řízenou rychlostí, který zahrnuje postupné snižování teploty o 1 °C za minutu, přičemž jako zmrazovací médium se používá CM-1 nebo CM-ACF.

• Proces rozmrazování: Při rozmrazování se lahvičky protřepávají ve vodní lázni o teplotě 37 °C, dokud nezůstane pouze malá hrudka ledu. Po naředění čerstvým médiem se buňky odstředí, aby se odstranilo zmrazovací médium, a resuspendují se v růstovém médiu pro kultivaci.

• Bezpečnostní opatření: Kultivace buněk PC-3 vyžaduje laboratoř s minimálně úrovní biologické bezpečnosti 1, aby bylo zajištěno bezpečné pracovní prostředí.

Dodržováním těchto klíčových bodů mohou výzkumníci úspěšně kultivovat a udržovat buňky PC-3, což usnadňuje studium biologie a léčby rakoviny prostaty.

Buňky PC-3 v různých stádiích konfluence po 1 dni a 3 dnech kultivace.

Vydáno: 2023 | Poslední revize: květen 2026

Buňky PC3: Prozkoumání výhod a výzev

Výhody buněk PC-3

• Metastatický potenciál: Buňky PC-3 jsou známé svým významným metastatickým potenciálem. Díky tomu jsou mimořádně užitečné pro zkoumání složitých procesů, které řídí metastázy rakoviny, a poskytují realistický model pro studium šíření nádoru.

• Modelování androgen-nezávislého karcinomu: Jako model androgen-nezávislého karcinomu prostaty jsou buňky PC-3 klíčové pro pochopení tohoto agresivního typu rakoviny. Díky absenci androgenového receptoru (AR) a exprese prostatického specifického antigenu (PSA) umožňují výzkumníkům studovat chování rakovinných buněk, které není ovlivněno androgeny, a poskytují tak vhled do mechanismů rezistence vůči standardním terapiím.

• Účinnost transfekce: Linie PC-3 je mimořádně vnímavá k transfekci, což z ní činí vynikající nástroj pro genetickou manipulaci a studie genové exprese, což je zásadní pro odhalení funkcí různých genů a jejich přínosu k progresi rakoviny.

• Snadná kultivace: Tyto buňky se v laboratorních podmínkách snadno pěstují a jejich udržování nevyžaduje žádné specializované postupy, což zjednodušuje jejich použití a umožňuje jejich využití v různých experimentech.

Výzvy spojené s buňkami PC-3

• Nereagování na androgenní stimulaci: Vzhledem k absenci receptoru androgenu (AR) nejsou buňky PC-3 vhodné pro studie, které vyžadují porozumění mechanismům androgen-dependentního karcinomu prostaty, což může představovat významné omezení při snaze pokrýt celé spektrum typů karcinomu prostaty.

• Rychlá proliferace: Rychlá rychlost růstu buněk PC-3 může vést k nadměrné konfluenci, což může narušit chování buněk a genovou expresi, a tím potenciálně ovlivnit konzistenci a spolehlivost experimentálních výsledků.

Výzkumné aplikace buněk PC-3

• Modely nádorových xenotransplantátů: Buňky PC-3 hrají klíčovou roli při vytváření podkožních nádorových modelů u myší a představují neocenitelný zdroj pro zkoumání mikroprostředí nádoru a testování účinnosti nových léků. Tyto modely jsou obzvláště užitečné při hodnocení přírodních sloučenin, jako je α-pinen, z hlediska jejich protinádorových vlastností.

• Porozumění biologii rakoviny: Studium buněčných mechanismů rakoviny prostaty je díky použití buněk PC-3 obohaceno. Tyto buňky hrály klíčovou roli při objasňování úlohy dlouhých nekódujících RNA a specifických genů v chování rakovinných buněk, čímž pomohly odhalit potenciální nové cíle pro léčbu.

• Objev a validace léčiv: Buněčná linie PC-3 se běžně používá při screeningu a validaci nových kandidátů na léčiva. Studie například prokázaly účinnost rostlinných extraktů, jako jsou například extrakty z rozmarýnu, při inhibici proliferace těchto rakovinných buněk, což naznačuje možné terapeutické využití.

Díky zdůraznění silných stránek a výzev spojených s buňkami PC-3 mohou výzkumníci činit informovaná rozhodnutí o jejich použití v různých experimentálních kontextech, od základní biologie až po předklinické testování nových terapeutických látek.

Podpořte své laboratorní objevy pomocí naší buněčné linie PC-3.

Vědecké publikace zabývající se buňkami PC-3

• α-Pinen inhibuje růst lidského karcinomu prostaty v myším xenotransplantačním modelu : Tato studie, publikovaná v časopise Chemotherapy Journal v roce 2018, zkoumá, jak α-pinen ovlivňuje progresi karcinomu prostaty v myším modelu PC-3.
• Kvercetin zesiluje terapeutické účinky paklitaxelu na rakovinu prostaty PC-3 prostřednictvím indukce stresu endoplazmatického retikula (ER) a produkce reaktivních forem kyslíku (ROS) : Tato publikace naznačuje, že kombinace paklitaxelu a kvercetinu má synergický účinek v boji proti rakovině prostaty.
• Zingeron potlačuje buněčnou proliferaci prostřednictvím indukce buněčné apoptózy a inhibice signální dráhy PI3K/AKT/mTOR v buňkách lidského karcinomu prostaty PC-3 : Tato studie, publikovaná v časopise „Journal of Biochemical and Molecular Toxicology“ (2021), zkoumá antiproliferační účinky zingeronu.
• TRPM 4 reguluje aktivitu Akt/GSK 3-β a zvyšuje signalizaci β-kateninu a buněčnou proliferaci v buňkách rakoviny prostaty : Jak bylo uvedeno v časopise Molecular Oncology v roce 2018, tato studie se zaměřuje na roli genu TRPM 4 v proliferaci buněk PC-3.
• Extrakt z kořene mikropropagované léčivé rostliny Prunus africana indukoval apoptózu v lidských buňkách rakoviny prostaty (PC-3) prostřednictvím aktivace kaspázy-3 : Tato studie z roku 2022, publikovaná v časopise „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“, naznačuje, že extrakt z Prunus africana může indukovat apoptózu v buňkách PC-3.

Komplexní průvodce zdroji buněčné linie PC-3

Buněčná linie PC-3 je známá svou významnou užitečností ve výzkumu rakoviny prostaty a v různých dalších vědeckých studiích. K dispozici je velké množství zdrojů, které pomáhají výzkumníkům při efektivní manipulaci, udržování a práci s touto buněčnou linií. Následující zdroje byly vybrány tak, aby poskytovaly návod pro různé laboratorní postupy zahrnující buňky PC-3.

• Kultivace buněk PC-3: Toto instruktážní video poskytuje jasnou demonstraci protokolů subkultivace nebo pasážování, které jsou nezbytné pro udržení vitality buněk rakoviny prostaty PC-3.
• Průvodce kryokonzervací buněk: Toto komplexní video slouží jako podrobný návod na správné postupy při zmrazování buněk, které zajistí jejich uchování pro budoucí výzkum.
• Protokoly pro transfekci buněk PC-3: Tento zdroj popisuje podrobné protokoly pro transfekci buněk PC-3, včetně optimálního použití reagencií a techniky.
• Výukové video k transfekci buněk PC-3: Vzdělávací video, které nabízí vhled do procesu in vitro transfekce buněk PC-3 a pomáhá lépe porozumět studiím genové exprese.

Protokoly pro udržování buněčných kultur

Konkrétní podrobnosti o protokolech pro kultivaci buněk PC-3 naleznete na níže uvedeném odkazu.

• Subkultivace buněk PC-3: Získejte přístup k přehlednému souboru protokolů pro subkultivaci, zmrazení a rozmrazení buněk PC-3, které jsou zásadní pro kontinuitu buněčné kultury a experimentování.

Často kladené otázky o buňkách PC3

Literatura

1. Tai, S., et al., PC3 je buněčná linie charakteristická pro malobuněčný karcinom prostaty. The Prostate, 2011. 71(15): s. 1668–1679.
2. Litvinov, I.V., et al., Lidské buňky karcinomu prostaty PC3, na rozdíl od buněk DU145, si zachovávají koregulátory nezbytné pro nádorově supresivní schopnost androgenového receptoru. The Prostate, 2006. 66(12): s. 1329–1338.
3. Zhao, Y., a kol., α-Pinen inhibuje růst lidského karcinomu prostaty v myším xenotransplantačním modelu. Chemotherapy, 2018. 63(1): s. 1–7.
4. Xing, P., et al., Potlačení exprese lncRNA MIR4435‑2HG a ST8SIA1 inhibuje proliferaci, invazi a migraci buněk rakoviny prostaty in vitro i in vivo blokováním aktivace signální dráhy FAK/AKT/β‑katenin. International Journal of Molecular Medicine, 2021. 47(6): s. 1–13.
5. Qian, S., et al., Zingeron potlačuje buněčnou proliferaci prostřednictvím indukce buněčné apoptózy a inhibice signální dráhy PI3K/AKT/mTOR v buňkách lidského karcinomu prostaty PC-3. Journal of Biochemical and Molecular Toxicology, 2021. 35(1): s. e22611.
6. Jaglanian, A., D. Termini a E. Tsiani, Extrakt z rozmarýnu (Rosmarinus officinalis L.) inhibuje proliferaci a přežití buněk rakoviny prostaty tím, že se zaměřuje na Akt a mTOR. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2020. 131: s. 110717.