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RKO
Tissue
Dos puntos
Disease
Carcinoma de colon

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RKO

Cell line · Product number 305035

RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...

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01General information

Description

Las células RKO son una línea celular de carcinoma colorrectal humano ampliamente utilizada en investigaciones relacionadas con el cáncer de colon. Se derivan de un adenocarcinoma de colon moderadamente bien diferenciado y se caracterizan por su estado de p53 de tipo salvaje, algo poco común entre muchas líneas celulares cancerosas. Esta característica hace que las células RKO sean particularmente valiosas para estudiar las funciones de p53 y los mecanismos celulares de reparación del ADN y la apoptosis en el contexto del cáncer colorrectal.

Las células RKO presentan una morfología epitelial y se caracterizan por su estabilidad genética y su capacidad de respuesta a una variedad de manipulaciones genéticas y farmacológicas. Se utilizan en estudios que se centran en las vías moleculares involucradas en la progresión del cáncer, incluyendo la regulación del ciclo celular, la transducción de señales y la metástasis. Las células RKO brindan información sobre el papel de diversos genes y factores ambientales en el desarrollo del cáncer colorrectal y ofrecen una plataforma para evaluar la eficacia de los medicamentos contra el cáncer.

Además, las células RKO se utilizan para explorar las complejas interacciones entre las células cancerosas y su microambiente, así como la respuesta inmunitaria a las células tumorales. Su sensibilidad a los agentes quimioterapéuticos y a la radiación las hace adecuadas para su uso en el descubrimiento y desarrollo de fármacos, lo que ayuda a identificar posibles dianas terapéuticas y a evaluar nuevas estrategias de tratamiento para el cáncer colorrectal.

En general, las células RKO son un recurso fundamental en la investigación del cáncer colorrectal, ya que contribuyen de manera significativa a nuestra comprensión de la biología molecular de la enfermedad y ayudan al desarrollo de tratamientos más eficaces.

Tissue
Dos puntos
Disease
Carcinoma de colon

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Epithelial
Tumourigenic
Sí

04Identifiers

Citation
RKO (número de catálogo de Cytion 305035)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0504

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Receptor de la uroquinasa (u-PAR)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), con: 2 mM de L-glutamina, con: 2,2 g/L de NaHCO₃, con: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS y un 1 % de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Ethnicity
Africano