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RKO
Tecido
Cólon
Doença
Carcinoma do cólon

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RKO

Cell line · Número do produto 305035

RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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1

01Informações gerais

Descrição

As células RKO são uma linha celular de carcinoma colorrectal humano amplamente utilizada na investigação relacionada com o cancro do cólon. São derivadas de um adenocarcinoma do cólon moderadamente bem diferenciado e distinguem-se pelo seu estatuto de p53 de tipo selvagem, o que é pouco comum em muitas linhas celulares de cancro. Esta caraterística torna as células RKO particularmente valiosas para o estudo das funções do p53 e dos mecanismos celulares de reparação do ADN e apoptose no contexto do cancro colorrectal.

As células RKO apresentam uma morfologia epitelial e caracterizam-se pela sua estabilidade genética e capacidade de reação a uma variedade de manipulações genéticas e farmacológicas. São utilizadas em estudos que incidem sobre as vias moleculares envolvidas na progressão do cancro, incluindo a regulação do ciclo celular, a transdução de sinais e as metástases. As células RKO fornecem informações sobre o papel de vários genes e factores ambientais no desenvolvimento do cancro colorrectal e oferecem uma plataforma para testar a eficácia de medicamentos anticancerígenos.

Além disso, as células RKO são utilizadas para explorar as interações complexas entre as células cancerosas e o seu microambiente, bem como a resposta imunitária às células tumorais. A sua sensibilidade aos agentes quimioterapêuticos e à radiação torna-as adequadas para utilização na descoberta e desenvolvimento de medicamentos, ajudando a identificar potenciais alvos terapêuticos e a avaliar novas estratégias de tratamento do cancro colorrectal.

Globalmente, as células RKO são um recurso fundamental na investigação do cancro colorrectal, contribuindo significativamente para a nossa compreensão da biologia molecular da doença e ajudando no desenvolvimento de tratamentos mais eficazes.

Tecido
Cólon
Doença
Carcinoma do cólon

02Classificação

Organismo
Humano
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Sim

04Identificadores

Referência
RKO (número de catálogo Cytion 305035)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0504

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Recetor de uroquinase (u-PAR)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Etnia
Africano