Tartalomra ugrás
RKO
Szövet
Vastagbél
Betegség
Vastagbélrák

Dokumentumok

RKO

Cell line · Termékszám 305035

RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az RKO sejtek egy humán kolorektális karcinóma sejtvonal, amelyet széles körben használnak a vastagbélrákkal kapcsolatos kutatásokban. A vastagbél mérsékelten jól differenciált adenokarcinómájából származnak, és a vad típusú p53 státuszuk miatt figyelemre méltóak, ami számos rákos sejtvonal között szokatlan. Ez a tulajdonsága különösen értékessé teszi az RKO sejteket a p53 funkcióinak, valamint a DNS-javítás és az apoptózis sejtmechanizmusainak tanulmányozására a vastagbélrák összefüggésében.

Az RKO sejtek epiteliális morfológiát mutatnak, és genetikai stabilitásuk, valamint a különböző genetikai és farmakológiai manipulációkra való érzékenységük jellemzi őket. A rák progressziójában szerepet játszó molekuláris útvonalakra, többek között a sejtciklus szabályozására, a jelátvitelre és az áttétképződésre összpontosító vizsgálatokban használják őket. Az RKO sejtek betekintést nyújtanak a különböző gének és környezeti tényezők szerepébe a vastagbélrák kialakulásában, és platformot nyújtanak a rákellenes gyógyszerek hatékonyságának teszteléséhez.

Az RKO sejteket továbbá a rákos sejtek és mikrokörnyezetük közötti összetett kölcsönhatások, valamint a tumorsejtekre adott immunválasz feltárására is használják. A kemoterápiás szerekkel és sugárzással szembeni érzékenységük alkalmassá teszi őket a gyógyszerkutatásban és -fejlesztésben való felhasználásra, segítve a potenciális terápiás célpontok azonosítását és a vastagbélrák új kezelési stratégiáinak értékelését.

Összességében az RKO-sejtek alapvető erőforrást jelentenek a vastagbélrák kutatásában, jelentősen hozzájárulnak a betegség molekuláris biológiájának megértéséhez, és segítik a hatékonyabb kezelések kifejlesztését.

Szövet
Vastagbél
Betegség
Vastagbélrák

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Daganatképző
Igen

04Azonosítók

Hivatkozás
RKO (Cytion katalógusszám: 305035)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0504

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Urokináz receptor (u-PAR)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Etnikai hovatartozás
Afrikai