Vai al contenuto
RKO
Tessuto
Colon
Malattia
Carcinoma del colon

Documenti

RKO

Cell line · Codice prodotto 305035

RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse
Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule RKO sono una linea cellulare di carcinoma colorettale umano ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro del colon. Derivano da un adenocarcinoma del colon moderatamente ben differenziato e si distinguono per il loro stato di p53 wild-type, non comune a molte linee cellulari tumorali. Questa caratteristica rende le cellule RKO particolarmente preziose per lo studio delle funzioni di p53 e dei meccanismi cellulari di riparazione del DNA e apoptosi nel contesto del cancro colorettale.

Le cellule RKO presentano una morfologia epiteliale e sono caratterizzate da stabilità genetica e reattività a diverse manipolazioni genetiche e farmacologiche. Sono utilizzate in studi incentrati sulle vie molecolari coinvolte nella progressione del cancro, tra cui la regolazione del ciclo cellulare, la trasduzione del segnale e la metastasi. Le cellule RKO forniscono approfondimenti sul ruolo di vari geni e fattori ambientali nello sviluppo del cancro del colon-retto e offrono una piattaforma per testare l'efficacia dei farmaci antitumorali.

Inoltre, le cellule RKO sono utilizzate per esplorare le complesse interazioni tra le cellule tumorali e il loro microambiente, nonché la risposta immunitaria alle cellule tumorali. La loro sensibilità agli agenti chemioterapici e alle radiazioni le rende adatte a essere utilizzate per la scoperta e lo sviluppo di farmaci, aiutando a identificare potenziali bersagli terapeutici e a valutare nuove strategie di trattamento per il cancro colorettale.

Nel complesso, le cellule RKO sono una risorsa fondamentale per la ricerca sul cancro colorettale, in quanto contribuiscono in modo significativo alla comprensione della biologia molecolare della malattia e allo sviluppo di trattamenti più efficaci.

Tessuto
Colon
Malattia
Carcinoma del colon

02Classificazione

Organismo
Umano
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
RKO (numero di catalogo Cytion 305035)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0504

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Recettore dell'urochinasi (u-PAR)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Etnia
Africano